第十章吸光光度法-公开课件.pptVIP

教学内容：物质对光的选择性吸收、光吸收定律及其应用条件、摩尔吸光系数与灵敏度；显色反应及其影响因素；吸光光度法的特点与应用、吸光光度法仪器 教学重点：吸收光谱、工作波长的确定、线性范围、检出限、准确度与精密度、回收率 教学难点：参比溶液的选择、共存离子干扰、络合物组成的确定 化学分析：常量组分(1%), Er : 0.1%～0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 特点 灵敏度高：测定下限可达10-5～10 -6mol·L-1, 10-4%～10-5% 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ （1～2％） 操作简便快速 应用广泛 c －真空中光速 2108m/s ~3.0 ×108m/s ?－波长，单位：m,cm,mm,?m,nm,? 1?m=10-6m, 1nm=10-9m, 1?=10-10m ? －频率，单位：赫芝(周)Hz 次/秒 n －折射率，真空中为1 h－普朗克(Planck)常数 6.626×10-34J·s ?－频率 E－光量子具有的能量 单位：J(焦耳)，eV(电子伏特) 1eV=1.602×10－19 J 结论:一定波长的光具有一定的能量，波长越 长(频率越低)，光量子的能量越低. . 吸光度与光程的关系 A = abc 吸光度与浓度的关系 A = abc 吸光度与波长的关系 A = abc 吸光度A、透射比T与浓度c 的关系 1.入一定的单色光即应选用?max处或肩峰处测定. ▲ 测定中的干扰以及消除方法 2. 物理法—选择适当的测定波长 3.选择适当的参比溶液 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. 方便、灵敏，准确度差. 常用于限界分析. 2. 光电比色法 滤光片 吸收滤光片：只允许指定的窄范围波长光通过，其他波长的光均被吸收. 3. 吸光光度法和分光光度计 分光光度计的主要部件 光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够 的光强度,稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 氙灯：紫外、可见光区均可用作光源 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 利用光通过光栅时发生衍射和干涉现象而分光。 吸收池(比色皿)：用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区：石英池 硒光电池（Barrier-layer photocell） 4.吸光光度法仪器主要差异比较 5.1. 单光束分光光度计 5.2. 双光束分光光度计 1.光学光谱区 2.光谱种类 6.荧光光谱的特点 Stokes位移：分子荧光的发射峰相对于吸收峰位移到较长的波长. 荧光发射光谱的形状与激发波长的选择无关. 镜像规则：荧光发射光谱和它的吸收光谱呈镜像对称关系. 7. 磷光分析法 获得较强磷光应采取的措施： 1. 低温， 检流计（指示器）： 低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录 检测器：利用光电效应，将光能转换成 电流讯号。 光电池，光电管，光电倍增管 适用于300-800 nm, 在500-600 nm范围最灵敏。 Se 阴极Au，Ag 半导体 h? 阳极 光电管(Phototube) h? （片） 红敏管 625-1000 nm 蓝敏管 200-625 nm 光电倍增管(Photomultiplier Tube, PMT) 1个光子可产生106～107个电子 160-700 nm NaCl晶体 石英 （185～4000） 玻璃 （350～3200） 吸收池 材料 硅碳棒 （红外线） 氢灯 氘灯 180～375 钨灯 碘钨灯 320～2500 光源 中红外 （2.5～ 50 ?m ) 紫外光 （200～380nm) 可见光 （380～780nm） 可变波长单光束紫外-可见分光光度计示意图 5. 分光