肿瘤部位光敏剂浓度检测.pptVIP

线性关系理论模型一 （这里给出理想检测时吸收激励光与激发荧光之间的关系，未考虑肿瘤细胞对激励光的散射、吸收、收集效率及肿瘤形状等因素） （1） （2） 线性关系物理模型二： 单一波长激励下光敏剂荧光相对与自体荧光的相对强度与光敏剂浓度线性关系。 在 波长激发下的公式关系 （4） （5） （6-1） （6-2） 考虑实际测量光谱值并非理论真实值，则定义如下关系式： （7） 则（7）式可改写为： （8） 上式中，N/R被认为待测荧光组织及返回激发光产生的背景噪声。 物理模型三：双波长激励下可消去噪声对线性关系的影响。 同理另一个波长 激励下 （9） (8)式与(9)式相减： （10） 令 则有 （11） 当待测肿瘤细胞浓度确定时， 为常量。 光谱分析实验研究 实验方案： 采用荧光质量分析仪对正常细胞、PSD007孵化肿瘤细胞、正常细胞荧光光谱进行检测。 正常细胞：大鼠的脾脏白细胞；肿瘤细胞:LG12 实验内容： 确定细胞自体荧光、PSD007光敏剂荧光、ALA光敏剂荧光特征峰的位置，对激发光源波长进行指导。 PSD007吸收光谱测量结果 No. 波长(nm) 吸收值 1 619.50 0.275 2 568.00 0.560 3 540.00 0.629 4 505.50 0.852 5 405.00 3.456 6 360.00 4.039 7 352.00 4.039 8 338.00 3.914 405nm激发下正常组织细胞荧光谱 400nm激发下肿瘤+PSD007光敏剂荧光谱 635nm激励下未发现荧光信号 细胞实验研究-理想定标?离体细胞定标 实验方案： 激发光源：405nm连续激光器、荧光质量分析仪 待测样品：纯不同浓度PSD007、孵化白血病肿瘤细胞 光线探头：平头多纤芯NA=0.22医用光纤 光谱仪：USB400、tristan光纤光谱仪（300-1000nm） 实验内容： 找到合适的光纤光谱仪积分时间。 调节光纤探头位置，找到距离待测样品的合适位置。 测量不同浓度下光敏剂荧光相对强度。 激光激励与荧光质量分析仪两种方法下测量结果进行对比。 荧光质量分析仪获得不同浓度PSD007光敏剂测量结果 荧光特征峰614nm处相对强度与光敏剂浓度之间线性关系 浓度范围0.019ug/ml-5ug/ml 浓度范围0.019ug/ml-0.625ug/ml 理想定标线性关系曲线——荧光质量分析仪 PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——低浓度 405nm光源激发下不同孵化浓度肿瘤细胞光敏剂荧光强度 405nm光源激发下肿瘤细胞裂解后光敏剂荧光强度 裂解前激发肿瘤细胞获得光敏剂荧光强度（高浓度孵化） 裂解后激发纯光敏剂荧光强度（高浓度孵化） PSD007孵化白血病肿瘤细胞测量结果——高浓度 孵化浓度为（6.25ug/ml-100ug/ml）PSD007，浸入细胞内浓度与光敏剂荧光特征峰（616nm）强度的线性关系 孵化细胞后离体定标线性关系曲线 ——荧光质量分析仪 光谱仪 405nm激光器 待测样品 光纤探头 高精度三维手动位移台 激光器连接头 光谱仪连接头 405nm激励下PSD007的荧光光谱信号 低浓度光敏剂与激发荧光特征峰值(614.9nm)的线性关系 405nm激发下的线性标定曲线——LD光源 405nm激光激发下白血病肿瘤细胞荧光信号 裂解前细胞内光敏剂的荧光光谱信号 裂解后的荧光光谱信号 405nm激光激发裂解后提取PSD007荧光光谱 注：裂解前405nm激光激发肿瘤细胞未发现荧光信号 孵化浓度（ug/ml） 100 50 25 12.5 6.25 浸入浓度（ug/ml） 荧光质量分析仪 0.590291 0.360572 0.20414 0.117778 0.07524 激光激发 0.43062 0.269362 0.219562 0.138933 0.07609 孵化浓度为（6.25ug/ml-50ug/ml）PSD007，浸入细胞内浓度与光敏剂荧光特征峰（613nm）强度的线性关系 两种实验条件下同样待测样品获得光敏剂孵化浓度推算结果如下表 生物组及其肿瘤实验研究 实验方案： 激发光源：405nm连续激光器、荧光质量分析仪 待测样品：PSD007浸入小鼠直肠及小鼠皮下植入肿瘤组织 光线探头：平头多纤芯NA=0.22医用光纤 光谱仪：USB400、tristan光纤光谱仪（300-1000nm） 实验内容： 小鼠分别采用涂抹与静脉注射两种方式给药。 405nm激光激发不同给药时间的光敏剂荧光特征峰强度变化情况。 不同组织部位荧光强度变化情况。 1小时直肠局部给药不同部位光敏剂荧光光谱 2小时直肠局部给药不同部位光敏剂荧光光谱 小鼠直肠局部涂抹PS