分子生物学技术在中药鉴定中的运用资料精.pdfVIP

维普资讯 世界科学技术一中药现代化★高技术应用 摘 要：本文总结了近年来分子生物学技术在中药鉴定，包括在动、植物药材鉴定方面的应用，井 简迷这些技术的原理和方法。将应用的分子生物学技术分为 3类：电泳技术、生物免疫技术和DNA分子 遗传标记技术 (1．基于PcR反应的方法，包括随机扩增多态DNA、任意引物聚合醇链反应、微卫星 DNA、扩增片段长度多态和毛钿管PCR；2．限制性片段长度多态和PCR产轴的RFIY分析；3．DNA谬4 序；4．高特异性PCR鉴别；5．DNA芯片或基固芯片鉴别)。本文可供中医药工作者作参考。 关键词：分子生物学 中药鉴定 电泳 免疫 DNA分子遗传标记 中药传统上是用经典的形态 分类学性状特征的动物药的鉴定确 科学，是当今世界生命科学领域中 分类学和解剖学特征，从基原、性 实是行之有效的，所以一直沿用至 最活跃和最具前途的学科 。它带动 状、显微及理化等方面进行药材品 今。然而一些局部人药的动物药材 了生物学乃至整个科学的发展。近 种的鉴别。性状鉴别是利用感官对 或经过多道工序炮制加工后的药材 10年来，分子生物学技术在农业 、 完整的药材或饮片进行鉴别，具有 或是道地药材，有的失去其原本性 生物工程、环境保护、畜牧水产等领 简单明了的特点；显微鉴别是利用 状而难辨真伪，有的难以分辨品质 域都得到了广泛的应用 ，为中药材 显微镜来观察药材的组织构造、细 优劣，尤其是道地药材和贵重的动 鉴别提供了一个崭新的研究思路。 胞形状以及内含物的特性，它对性 物药材，如熊胆、鹿鞭、牛黄等，由于 分子生物学研究发现，生物物种的 状相似的中成药的鉴定有独到之 传统的鉴别方法难 以很好地鉴别， 多样性是其基因多态性的结果 ，而 处；理化鉴别利用物理或化学的方 造假问题尤其严重，以假乱真 ，以次 基因多态性可以在不同的水平上进 法，对药材及其制剂所含的主要化 充好，致使假药、劣药长期困扰中药 行检测，包括传统的器官水平(形态 学成分进行鉴定 ，如薄层层析法、 材市场 ，阻碍着中药的发展，这一矛 学、分类学特征)、组织水平 (解剖学 荧光法、紫外、红外光谱法等。这些 盾亟待1薛决。 特征)、染色体水平 (细胞学特征)、 方法简便易行，对于植物药、矿物 分子生物学是从分子水平研究 化学水平和分子水平。分子水平一 药和大多数以整体人药而保持其 生物体的生命活动及其规律的--Jl 般有蛋白质肽谱 (生物化学特征)、 World~ienceandTechnology／Modernizcz~nofTradiawml~hine*eMedicine) 29 维普资讯 2001 第三卷 第四期 同功酶酶谱 (酶学特征)以及DNA 比较，证明了混淆品四籽野豌豆和 免疫技术则适用于动物药材的鉴 指纹图谱(分子生物学特征)。中医 硬毛果野豌豆的种子与王不留行中 别，尤其是亲缘关系比较接近的动 药工作者以分子生物学为武器，在 的可溶性蛋 白质具有较 明显的差 物药间的鉴别。免疫技术的依据是 动、植物药材的鉴别，包括道地药材 异，可藉此作出准确鉴定。 不同种的动物均含有特异性蛋 白 的鉴别方面做了许多工作。 陈振江等 则对金钱白花蛇可 质，这些蛋白质的表面氨基酸都有 溶性蛋 白进行 了3种凝胶 电泳研 一 小部分决定或控{}I抗原、抗体特 一 、 电泳技术 究，根据聚丙烯酰胺凝胶电泳谱带 异性反应的抗原决定基，也就是具 (Electrophoresis，EP) 的位置和数 目进行品种鉴别，清晰 有免疫特异性。利用免疫反应可以 带电荷的粒子在电场中随缓冲 可见正品只有一个明显的主带；用 鉴别出动物药的基原。