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实验二 糖类的颜色反应 一、实验目的 1．了解糖类某些颜色反应的原理。 2．学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、实验原理 1.α-萘酚反应（Molisch反应）原理 糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。 2.间苯二酚反应（Seliwanoff反应）原理 在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。 材料与方法 1.α-萘酚反应（Molisch反应） 取5支试管，分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。斜执试管，沿管壁慢慢加入浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察、记录各管颜色。 2.间苯二酚反应（Seliwanoff反应） 取3支试管，分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5ml。再向各管分别加入塞氏试剂5mL，混匀。将3支试管同时放入沸水浴中，注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。 结果与分析 试剂 现象 产生现象的时间排序 1%葡萄糖 浅紫色环，试样淡棕色 4 1%果糖 浅紫色环，试样深棕色 5 1%蔗糖 深紫色环，试样深棕色 2 1%淀粉 深紫色环，试样淡棕色 3 1%糠醛 深紫色环，试样黑色 1 表1 试剂 现象 1%葡萄糖 4分02秒开始变红色 1%果糖 2分45秒开始变红色 1%蔗糖 2分49秒开始变红色 表2 1.由表1可知，葡萄糖，果糖，蔗糖，淀粉，糠醛均可发生Molisch反应，但产生的紫环颜色不同，反应后试样的颜色也不同，其中糠醛的紫环颜色最深，且试样颜色为深棕接近黑色。加入浓硫酸后，糠醛溶液立刻发生变化，淀粉和蔗糖产生现象时间相当。 发生以上现象是因为糖类在浓硫酸作用下脱水形成糠醛及其衍生物，才能与α-萘酚反应，这需要一定的时间，不同种类的糖需要的时间不同，因此产生紫环现象的时间不同，而糠醛溶液可直接与α-萘酚反应，所以产生紫环现象的时间最短。且不同的糖性质不同，导致紫环的颜色也不同。 2.由表2可知，果糖溶液最先变红，蔗糖溶液出现红色的时间与果糖几乎相同，葡萄糖溶液变红时间最晚，且颜色最淡。 果糖是酮糖，在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质，因此果糖反应最快。而蔗糖是二糖，可水解为酮糖。葡萄糖是醛糖，醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。 讨论与结论 Seliwanoff反应试验中，1%的果糖和蔗糖均在2分40秒左右出现红色，葡萄糖在4分钟左右变色。前人所做试验中1%的果糖和蔗糖有在2分钟时开始变色，有在3分钟时开始变色，1%的葡萄糖有在3分时变色，有在4分钟时变色。因此我所做的试验结果与前人相似。但有些试验中加热时间延长到20分钟，分别记录2分钟，5分钟，10分钟,20分钟时溶液的颜色，发现在2分钟时果糖有黑色沉淀生成，其他溶液均无沉淀。加热至10分钟后，溶液均变为棕色或黑色。加热时间应在1~5分钟为宜，试样浓度在0.5%~1%最适宜。 本次实验我做的基本正确，通过实验验证了α-萘酚反应和间苯二酚反应，了解了糖类颜色反应的原理，操作和现象。 参考文献 张世仙，刘 焱，朱 彬，金 茜，曾启华，α萘酚，硫酸法测定酒糟多糖含量[J].食品科学 ,2013，34(18):245-248. 　陆红 ,何正平 ,吴忠良 ,淀粉与碘的颜色反应与还原糖含量的关系[J].　实验室研究与探索，2005,24(3)：31-32 杨万政 ，对 Molisch实验两 个 问题的探讨[J].1河北林院学报 1995,10（4)：346-347 朱万仁，关 于 Seliwanoff反应 机 理 的初 探 [J].大学化学，1998，13(2)：46-48 陈 忠 云 ,关于戊糖和己糖在强酸作用下形成峡喃机理的讨论[J].大学化学1992，7(5):55-63 和 渊 ,还原糖鉴定实验中还原糖含量与反应颜色变化的关系[J].教学仪器与实验，2015,31（1）：25-27 哈森其术格，贺锋嘎 ，间苯二酚分光光度法测定芥菜多糖 中的果糖含量[J]