临床基因扩增污染防控.pdfVIP

临床基因扩增污染的防控 新疆临床检验中心 张朝霞 主要内容 u一 污染的来源 u二 污染的监控 u三 污染的预防 u四 去污染的措施 实验室污染的防控 来 源 去 监 除 污染 控 预 防 一、污染的来源 （一）标本污染 2、标本放置时， 3、容器外粘有 1、收集标本的 由于密封不严 标本造成相互 容器被污染； 溢于容器外； 间交叉污染； 4 、标本核酸模板在提 取过程中，由于加样器 污染导致标本间污染； 5、有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形 成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。 （二）试剂的污染 主要是在PCR试剂配制过程中，由于加样器、 容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。 （三）扩增产物污染 u 最主要、最常见的污染, PCR产物数量大，远远高 于PCR检测的最低极限，所以极微量的PCR产物污染 ，就可形成假阳性。 （四）实验操作的污染 样品收集 核酸提取 扩增分析 避免交叉污染 二、污染的监控 设 置 不 同 的 对 照 可 1份阴性原血清样本； 以监 测 污 染 是 否 发 生。 1份在标本核酸提取过程 中带入的一个空管； 1份仅含扩增反应混合液的 对照管。 1份阳性对照的设置 1、阴性原血清对照样本的功能： • 监测实验室的以前扩增产物的污染； • 由实验操作所致的标本间的交叉污染； • 扩增反应试剂的污染。 2、核酸提取过程中一个空管对照的功能： • 基本功能与阴性原血清样本相同； • 其基质为水，不含阴性原血清对照样本中 可能存在的扩增抑制物，因而对污染 的反 映更为灵敏；不能取代原血清阴性样本。 3、仅含扩增反应混合液的对照管的功能： • 监测扩增试剂是否发生污染，具有较强的污染鉴别性。 • 如想鉴别实验室是否发生污染，可将一个或多个空管打 开静置于标本制备区30～60分钟，然后加入扩增反应 混合液同时以水替代核酸样本扩增，如为阳性，而上述 仅含扩增反应混合液的对照管为阴性，则说明实验室以