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蛋白质组学
蛋白质组学 • 大规模研究蛋白质的结构和功能
• 复杂程度远远超过基因组学
双向电泳技术 • 蛋白质组随蛋白质和基因及环境的生物化
学反应而变化
• 同一生物在生物体的不同部位、生命的不
质谱技术 同时期、以及不同的环境中，具有不同的
蛋白质表达
分离混合蛋白质样品
双向电泳技术
第一向：等电聚焦 （isoelectric focusing IEF ）
Two-Dimensional Electrophoresis
电泳，根据蛋白质等电点
with Immobilized pH Gradients
第二向：SDS电泳，根据蛋白质分子量
for Proteome Analysis
1
• 蛋白质分子在溶液中由于其N-末端、COOH-末端及
侧链的游离基团而成为带电颗粒，并可在电场内移
动，其移动方向取决于蛋白质分子所带净电荷。不同
第一向：IEF 电泳 蛋白质分子根据其氨基酸组成及所在溶液的pH值，
根据等电点分离蛋白质 携带的静电荷不尽相同，致使它们在电场中的迁移率
各异，从而达到分离的目的。
• 使蛋白质分子所带正电荷与负电荷相等，即净电荷为
零时的溶液的pH值称为蛋白质的等电点 （isoelectric
point ，PI ）
• 预制IPG （Immobilized pH gradients ）胶
条，在电场作用下能形成连续的固定pH
梯度。蛋白质在电场中泳动，到达其等电
点位置后停止。
• 宽 （几个pH单位）
• 窄 （1个pH单位）
• 超窄范围 （0.1个pH单位）
第二向：SDS电泳
根据分子量分离蛋白质
将IEF后的胶条转移到垂直板聚丙烯酰
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