甘蔗ScMOC1基因启动子的克隆与瞬时表达分析.PDFVIP

植物遗传资源学报2019 ，20 （3 ）：709-717 Journal of Plant Genetic Resources DOI ：10.13430/ki.jpgr.20181015001 甘蔗ScMOC1 基因启动子的克隆与瞬时表达分析 1 1 1 1 1 1 1 李旭娟 ，林秀琴 ，字秋艳 ，李纯佳 ，徐超华 ，吴转娣 ，朱建荣 ， 1 2 1 刘洪博 ，方志存 ，刘新龙 1 （云南省农业科学院甘蔗研究所/ 云南省甘蔗遗传改良重点实验室，开远 661699 ； 2 屏边苗族自治县农业和科学技术局，云南屏边 661200 ） MOC1 属于植物特有的GRAS 家族蛋白基因，是调控植物腋芽形成发育的关键基因。启动子对基因转录效率起直 摘要： 接调控作用，其功能分析可以精确定位基因的表达部位、发育阶段和调控机制，克隆甘蔗腋芽形成发育关键基因ScMOC1 的 启动子序列，研究其功能对该基因表达调控机制具有重要意义。本研究以我国主栽甘蔗品种新台糖22 号（ROC22 ）的基因组 DNA 为模板，通过基因组步移和巢式PCR 技术克隆到ScMOC1 起始密码子ATG 上游 1874 bp 的启动子序列。PlantCARE 在 线分析预测表明，该序列包含多个真核生物启动子必需的核心元件TATA-box 、CAAT-box 以及与光响应、激素响应和分生组 织表达等相关的顺式作用元件，推测ScMOC1 启动子可通过激素诱导调控 ScMOC1 表达，且该启动子可能通过分生组织表达 顺式调控元件CAT-box 参与ScMOC1 对甘蔗分蘖的调控。将获得的启动子序列替换pBI121 质粒中的CaMV35S 启动子驱动 GUS GUS ′ 下游 基因表达进行活性分析，结果表明：本研究克隆的启动子片段能驱动 基因在甘蔗嫩叶中瞬时表达。5 缺失分 析表明该启动子的基础启动子序列在起始密码子ATG 上游350~500 bp 之间。该结果为后续ScMOC1 的调控机制研究奠定 了良好的基础。 ScMOC1 关键词：甘蔗； 启动子；克隆；瞬时表达分析 Cloning and Transient Expression Analysis of ScMOC1 Promoter in Sugarcane 1 1 1 1 1 1 LI Xu-juan ，LIN Xiu-qin ，ZI Qiu-yan ，LI Chun-jia ， XU Chao-hua ，WU Zhuan-di ， 1 1 2 1 ZHU Jian-rong ， LIU Hong-bo ， FANG Zhi-cun ， LIU Xin-long 1 （ Sugarcane Research