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活性氧检测试剂盒活性氧检测试剂盒 活性氧检测试剂盒活性氧检测试剂盒 ROS Detection Kit 说明书修订日期说明书修订日期：：2015.07.13 说明书修订日期说明书修订日期：： Cat number：KGT0101 Store at 20℃ for 6 months，protected from light For Research Use Only （科研专用） 一、一、试剂盒说明试剂盒说明 一一、、试剂盒说明试剂盒说明 活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit)是一种利用荧光探针DCFHDA进行活性氧检测 的试剂盒。DCFHDA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，可以被细胞内的酯酶水解生成 DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的 DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平。 本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂Rosup，以便于活性氧的检测。Rosup是一种混合物(compound mixture),浓度为50mg/ml 。 本试剂盒本底低，灵敏度高，线性范围宽，使用方便。 本试剂盒可以测定100500个样品。 二、二、试剂盒组份试剂盒组份 二二、、试剂盒组份试剂盒组份 Cat: KGT010-1 储存条件储存条件 储存条件储存条件 组份组份 组份组份 100 assays DCFHDA (10mM) 0.1ml 20℃，避光 活性氧阳性对照(50mg/ml) 1.0ml 三、三、试剂盒以外自备仪器和试剂试剂盒以外自备仪器和试剂 三三、、试剂盒以外自备仪器和试剂试剂盒以外自备仪器和试剂 流式细胞仪或荧光显微镜、低速离心机、微量移液器 1.5ml Microtube、载玻片、盖玻片 （荧光显微镜观察需用）、PBS、不含EDTA 的胰酶消化液 四、四、使用注意事项使用注意事项 四四、、使用注意事项使用注意事项 1.探针装载后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。 2.探针装载完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的装载情况是 否良好。DCF的激发光谱和发射光谱请参考下页图谱。 3.尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外)，以减少各种可能的误差。 4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 五、五、操作方法操作方法 五五、、操作方法操作方法 1. 装载探针 对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞，先装载探针，后用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细 胞。对于细胞刺激时间较长(通常为6小时以上)的细胞，先用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞， 后装载探针。 原位装载探针原位装载