核酸的结构和功能Structureandfunctionofnucleicacid.ppt

3.1.1 溶解性 3.1.2 电性 3.1.3 粘度 3.1.4 电泳 3.1.5 核酸的水解 3.1.6 核酸的酸碱性质 3.1.5 核酸的水解 核酸带有糖苷键和磷酸二酯键，故可被酸、碱、酶水解 嘌呤碱的N9或嘧啶碱的N1与戊糖的C1形成糖苷键 磷酸基与2种戊糖分别形成核糖磷酸酯和脱氧核糖磷酸酯 酸 水 解 糖苷键和磷酸二酯键都能被酸水解 糖苷键比磷酸二酯键更易被酸水解 嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键对酸更不稳定 对酸最不稳定的是嘌呤与脱氧核糖之间的糖苷键 碱 水 解 RNA的磷酸二酯键易被碱水解，产生核苷酸 DNA的磷酸二酯键不易被水解。 3.1.6 核酸的沉降特性 溶液中的核酸分子在引力场中可以下沉。不同构象的核酸（线形，开环，超螺旋结构）、蛋白质及其他杂质在超离心机的强大引力场中，沉降的速率有很大差异，所以可以用超离心法纯化核酸，或将不同构象的核酸进行分离，也可以测定核酸的沉降常数与分子量。 RNA分离常用蔗糖梯度。分离DNA时用得最多的是氯化铯梯度 。 2.2 RNA的分子结构 tRNA rRNA mRNA tRNA结构 tRNA分子中含有氨基酸臂、二氢尿嘧啶环、反密码环、额外环和T?C环 氨基酸臂 ：7bp组成，富含G，5’-pG或pC，3’-CCA-OH，氨基酸连接在腺苷酸残基(A)上 。 TψC环：由7个碱基组成，参与tRNA与核糖体表面的结合 额外环或可变环：碱基种类和数量（3~18个碱基）高度可变，富含稀有碱基。环大小与生物种类有关，tRNA分类的指标。 反密码子环：由7个碱基组成，处于中间位的3个碱基为反密码子，常含有次黄嘌呤核苷酸。反密码子可与mRNA中的密码子结合。毗邻反密码子的3‘端碱基往往为烷化修饰嘌呤，其5’端为U，即：U-反密码子-修饰嘌呤。 rRNA结构 ⑴ rRNA分子量为103-106D， 存在于核糖体中，核糖体中有60%是rRNA，其余40%是蛋白质,占总RNA的75%-80%。原核生物大肠杆菌的rRNA有5S、16S和23SrRNA三种，动物细胞有5S、5.8S、18S和28S rRNA四种。 RNP结构 5SRNA结构 mRNA结构 mRNA是蛋白质生物合成的模板,是遗传信息的传递者. 每一种蛋白质多肽链由一种特定的mRNA编码，故细胞内mRNA种类很多，但每一种mRNA的数量却很少（5%以下），瞬时含量低，代谢率高。分子大小差异很大. 帽子结构区 5’非编码区 编码区 3’非编码区 polyA尾巴 原核生物 真核生物 帽子结构 m7GPPPN，m7GPPPNm，m7GPPPNmNm 尾巴结构 3 核酸的理化性质及应用 3.1 核酸的一般性质 3.2 核酸的紫外吸收 3.3 核酸的变形复性和分子杂交 3.1 核酸的一般性质 3.1.1 溶解性： RNA为白色粉末状，DNA是白色纤维状固体，二者均溶于水，而不溶于一般有机溶剂中，故常用冷乙醇从水溶液中将核酸沉淀出来。(核蛋白) 3.1.2 电性： 核酸是两性电解质，但酸性强，与金属离子结合成盐，也可与碱性蛋白（组蛋白）结合；介质pH大于4时，呈阴离子，电泳时向阳极移动；DNA在pH4~11间最稳定，超出此范围易变性。 3.1.3 粘度： 大多数DNA为线性分子，长度可达数厘米，直径仅为2nm，故DNA溶液粘度很高，分子极易断裂；RNA溶液粘度较小 。 3.1.4 电泳： 由于核酸核酸在中性或碱性环境下带负电荷。因而可以利用电泳对核酸进行分离。电泳介质有琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶。电泳后的染色通常利用一种叫溴化乙锭的试剂，该分子呈扁平形，可插入核酸分子的碱基间。紫外线照射下会发出红橙色荧光。 磷酸与核苷的不同连接 ATP ADP AMP ATP ADP AMP dATP dADP dAMP GTP GDP GMP dGTP dGDP dGMP CTP CDP CMP dCTP dCDP dCMP UTP UDP UMP dTTP dTDP dTMP 游离核苷酸及核苷酸衍生物： 除形成核酸外，细胞内还存在多种游离核苷酸及核苷酸衍生物。 比如第二信使cAMP，辅酶NADH等。 2 核酸的分子结构 2.1 DNA的分子结构 2.2 RNA的分子结构 2.1 DNA的分子结构 DNA的一级结构 DNA的二级结构 DNA的三级结构 DNA的一级结构 DNA的一级结构指的是组成DNA分子的脱氧核苷酸的