化学发光免疫基本知识的相关概述.ppt

化学发光免疫分析;;一、化学发光免疫技术的概念;;;化学发光免疫分析的优势;;;二、化学发光免疫分析基本原理;;三、化学发光免疫分析的类型; 用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光 。 由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标???曲线上计算出待测抗原的含量。;发光;; 化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme 　immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶(ALP)来标记抗原或抗体，在与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物(发光剂)，酶催化和分解底物发光，由光量子阅读系统接收，光电倍增管将光信号???变为电信号并加以放大，再把它们传送至计算机数据处理系统，计算出测定物的浓度。 ;该分析系统采用辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体(或抗原)，在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶（HRP）标记抗体复合物，这时加入鲁米诺发光剂、H2O2和化学发光增强剂使产生化学发光。;;该分析系统以碱性磷酸酶 标记抗体(或抗原)，在与反应体系中的待测标本和固相载体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，这时加入AMPPD发光剂，碱性磷酸酶使AMPPD脱去磷酸根基团而发光。 ;;分析步骤;电化学发光免疫分析（electrochemiluminescence immunoassay， ECLIA）是以电化学发光剂三联吡啶钌标记 抗体(抗原)，以三丙胺(TPA)为电子供体， 在电场中因电子转移而发生特异性化学发光 反应，它包括电化学和化学发光两个过程。 ;在电化学发光免疫分析系统中，磁性微粒为固相载体包被抗体(抗原)，用三联吡啶钌标记抗体(抗原)，在反应体系内待测标本与相应的抗原 (抗体)发生免疫反应后，形成磁性微粒包被抗体-待测抗原-三联吡啶钌标记抗体复合物，这时将上述复合物吸入流动室，同时引人TPA缓冲液。当磁性微粒流经电极表面时，被安装在电极下面的电磁铁吸引住，而未结合的标记抗体和标本被缓冲液冲走。与此同时电极加压，启动电化学发光反应，???三联吡啶钌和TPA在电极表面进行电子转移，产生电化学发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。;;电化学发光免疫测定示意图;标记磁颗粒在电场中发光工作示意图; 目前我院最新引进的迈瑞CL-2000i 全自动化学发光免疫分析系统主要以化学发光酶免疫分析为主。拥有国内完全自主知识产权，它的酶促化学发光是目前免疫诊断中最灵敏的化学发光体系之一，其核心性能达到了国际同类产品先进水平。;该机采用高灵敏全球主流化学发光技术的CL-2000i 分析系统，拥有业内领先的高效处理能力，可实现240T/H检测；智能优化的测试流程，专利逻辑设计，提升测试通量，瀑布式真空气吸清洗技术降样本携带干扰至最低，涵盖甲状腺功能、激素、肿瘤标志物、传染病等50多个检测项目。 目前我科开展肿瘤标志物，甲状腺功能检测，生殖内分泌激素检查项目，后续依临床需要酌情开展新的项目，更好的服务临床，服务患者; 四、临床应用;甲状腺功能检测项目及临床意义 ;甲状腺素（T4）;;血清中的三碘甲状腺原氨酸（T3）;;游离甲状腺素（FT4）游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）;;;促甲状腺激素（TSH）;促甲状腺激素（TSH）;肿瘤标志物（tumor marker，TM）;肿瘤标志物临床应用;甲胎蛋白(AFP) 参考值：7.0ng/ml;;癌胚抗原（CEA）参考值：4.5ng/ml;铁蛋白（SF）男:27-375ug/l 女:12-135ug/l;乳腺癌相关抗原（CA15-3）参考值：15U/ml;卵巢癌相关抗原（CA125）:参考值：35U/ml;胰腺胃肠癌相关抗原（CA19-9）参考值：30U/ml;总前列腺特异性抗原（TPSA）参考值：4.0ng/ml;游离前列腺特异性抗原（FPSA）参考值:1ng/ml;;肿瘤标志物的相关肿瘤;肿瘤标志物的联合应用;性激素检测系列;卵巢、子宫内膜与激素水平 ;雌二醇E2;雌三醇E3 ;孕激素PROG ;雄激素TESTO;垂体催乳激素PRL ;垂体促性腺激素（LH和FSH）;人绒毛膜促性腺激素（HCG）;;;甲状腺素与性激素;五、发展与展望;目前我科室开展的成熟项目简介;全程CRP;全程CRP临床应用;心梗三联;