米根霉发酵产富马酸的最适替代中和剂及pH调控策略研究.pdf

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３３（４）：８５９１ 米根霉发酵产富马酸的最适替代中和剂 及ｐＨ调控策略研究 陈　晨　邰　超　李　霜 （南京工业大学生物与制药工程学院材料化学工程国家重点实验室　南京　２１０００９） 摘要　针对米根霉发酵产富马酸使用的不同中和剂（ＣａＣＯ，ＮａＣＯ，ＮＨ ·ＨＯ，ＮａＯＨ）进行了 ３ ２ ３ ３ ２ 研究，结果表明发酵过程中使用ＮａＣＯ作为中和剂时富马酸产率和生产强度最接近传统中和剂 ２ ３ ＣａＣＯ。此后考察了不同ｐＨ值（３．５，４．５，５．５和６．５）对ＮａＣＯ 作为中和剂的富马酸发酵过程 ３ ２ ３ 的影响。基于对３个动力学参数的分析，提出了一个旨在同时获得富马酸高产物浓度、高产率和 高生产强度的双阶段ｐＨ调控策略，在初始的２４ｈ内ｐＨ控制在５．５，然后将ｐＨ调到４．５直至发 酵结束。最终富马酸的终浓度达到４０．５ｇ／Ｌ，产率为０．５５ｇ／ｇ，生产强度为０．６１ｇ／Ｌ／ｈ，比恒定 ｐＨ时的最优结果分别提高了８．３％，１０．０％和１７．３％，其中生产强度甚至比使用ＣａＣＯ 时还高了 ３ ３．４％。故以ＮａＣＯ作为中和剂，采用双阶段 ｐＨ调控策略具有降低能耗和简化下游步骤的优 ２ ３ 势，可以成功取代ＣａＣＯ。 ３ 关键词　富马酸　米根霉　中和剂　动力学分析　双阶段ｐＨ调控策略 中图分类号　Ｑ８１９ 　　富马酸在诸多工业领域有着广泛的应用，例如为 高富马酸盐的溶解度，同时保证富马酸的产率和降低 造纸工业合成浆纱树脂，在食品工业中作为酸味剂，同 生产成本。这些替代中和剂，尽管各自具有一定的优 ［１２］ 时也作为聚合物工业生产中颇具功能的前体 。 势，但由于富马酸产率和生产强度低下，结果都与成功 　　如今使用的富马酸大多是通过苯的催化氧化制得 相去甚远。这些研究中，发酵液的ｐＨ都保持在恒定的 的。由于苯被广泛认为是一种致癌物，而真菌发酵在 ５．５左右，所以他们只是简单地取代了中和剂而没有涉 食品和药品工业中越来越广泛的应用使得通过真菌发 及ｐＨ控制策略。大量关于ｐＨ的报道指出，其对微生 ［３４］ 酵生产富马酸得到了越来越多的关注 。尤其是毛 物菌体生长和发酵过程中有机酸的积累、运输以及分 ［５７］ 霉菌目的根霉属被很多学者进行了研究 。研究发 泌有显著影响［１５１７］。所以ｐＨ是影响细胞生长和有机 现根霉属的微生物无法耐受高酸度，在中和剂存在的 酸合成的最重要的环境参数之一，但是由于一直使用 ［８９］ 条件下，菌体生长和富马酸产量都会大幅提高 ， 过量的ＣａＣＯ作为中和剂，人们对于不同ｐＨ值对富马 ３ ＣａＣＯ 因此而被广泛应用［１０１２］。但是其缺点是形成的 ３ 酸发酵的影响所知甚少。基于ｐＨ值对富马酸发酵影 富马酸钙盐的溶解度对扩大生产来说在经济上不可