蛋白质二维电泳对外技术服务说明.doc

天津生物芯片技术有限责任公司 PAGE PAGE 1 电话：0229590 email： service.biochip@ 网址： 蛋白质二维电泳对外技术服务说明 样品要求： 样品新鲜。 说明：组织样本及细胞采样后应立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂，运输过程中血液、血清样品4℃保存，其它样品-20℃保存，不超过48小时（若外地邮寄，除血液、血清及细胞外 样品蛋白的总量不少于1mg。 说明：组织样本每份约250-500mg； 细胞样品每份5*107细胞数以上； 血液、血清等样品大于5mL，且不能溶血； 蛋白提取物要求蛋白浓度大于5mg/mL，总量不少于1mg，且均匀无沉淀，样品中无盐成分； 植物或真菌样品量湿重不少于2g； 富含杂质或蛋白质含量低的样品量湿重不少于3g。 其它要求及说明： （1）蛋白溶液中不得含有SDS等离子型去污剂，缓冲液成分为 说明：为保证实验效果，请尽量告知缓冲液成分。 （2）样品中应不含核酸、脂类、多糖等影响电泳分离效果的成分。如样品较特殊（富含核酸，盐分，脂类，色素，多糖等影响双向电泳而需去除的杂质或需浓缩样品），请预先说明： （3）样品PI值 说明：如目的蛋白等电点偏碱，不能保证分离效果，因而通常情况下不收PI值大于8.0的碱性蛋白。 （4）此说明中样品量适用于考染，如需银染，请另行咨询。 （5）样品如有特殊要求，请说明： 收样确认： 公司收到客户样品后，将会对样品外观及包装进行初步检验，若是邮寄过程中出现的问题我公司将不承担责任，确认样品无问题后，我公司会按客户要求正确保存样品； 公司在样品提取过程中将对样品的状态（如气味、颜色等）进行检验，，若是由于邮寄等原因造成样品变质，我公司将不承担责任； 客户提供样品若为组织或细胞，我公司将根据样品的特点，选择适当的蛋白提取方法提取纯化蛋白，并按Bradford法测定样品蛋白的总浓度，如浓度不合格，公司将与客户协商后确定下一步方案； 客户提供样品若为蛋白样品，客户应将其溶解在裂解液中,-20℃保存，并保证蛋白浓度大于5mg/mL，蛋白总量不小于1mg，收到样品后我公司将按Bradford法再检测浓度 进行正式实验前，我公司将和客户协商上样量等问题； 若样品不符合上述样品收取规定，我公司将和客户协商决定重新送样或退样。如遇特殊样品，双方协商决定实验具体事宜。 实验完成说明 本公司提供的蛋白质二维电泳实验是利用蛋白质的等电点和分子量将样品中总蛋白分开。 实验方法包括由客户提供样品，我公司进行蛋白抽提、第一相等点聚焦、第二相聚丙烯酰胺凝胶电泳、染色、脱色等实验，质控指标为蛋白marker。 实验完成标准 我公司负责样品提取：Marker条带清晰、大多数蛋白点清晰圆润、没有或略有横竖纹（如果是银染，横竖纹可能稍多）。 客户自行样品提取：Marker条带清晰。 整套工作完成后，提供完整的试验结果报告，包括： ?A：蛋白上样浓度、上样量一份； ?B：试剂耗材、仪器设备、操作过程一份； ?C：胶图扫描图一张； ?D：剩余样品(如果剩余)。 收费标准 二维电泳中的工作项目具体收费情况如下： 实验项目 具体收费 说明 蛋白质样品制备 100-300/例（特殊样品另行协商） 客户提供血液、动、植物组织或细菌 样品脱盐 150元/例 将高分子中溶液中的低分子量盐分杂质去除 除高丰度蛋白 300元/例 蛋白质二维电泳 600元/例 SDS 300元/例 染色—考染 100元/例 染色—银染 150元/例 2、具体收费说明： 实验出现情况 收费 不收费 其他说明 客户自己提取样品，由于在样品制备过程出现的问题，造成实验结果不好，影响实验分析的，我公司不承担责任。 如1.所用试剂不纯2.试剂过期3.蛋白未纯化好，里面的糖等非蛋白杂质没有除干净4.样品中含盐太高5.蛋白过于偏碱6.蛋白样品在水中溶解性小，造成蛋白没有充分溶解7.其他情况 ∨ 除样品提取外，其他费用正常收取 若公司提取样品，出现上述情况 ∨ 和客户进行协商，决定是否重新提取样品 公司提取样品，对样品正常提取，完好无损 ∨ 样品提取费用正常收取 样品提取过程中，将样品丢失或污染 ∨ 实验完成后，蛋白Marker没出来 ∨ 征得客户同意后，免费重做二维电泳，重做结果符合收费标准的需要收取重做实验费用；重做结果仍旧不符合收费标准，不收费或者根据客户要求继续重做 实验完成后，蛋白Marker出来，略有拖尾或横竖纹等，属于实验正常现象 ∨ 实验结束后，蛋白Marker出来，采用银染方法，由于银染的特殊性，结果会比考染出现的横竖纹多或拖尾略严重等情况，属于实验正常现象 ∨ 其他情况，造成的实验结果无法使用。 如1.电压设置不对2.胶条泡制过程出的问题3.第二向胶条没有放好，造成蛋白点没有出来等4