黄芪中异黄酮成分的药代动力学特征及肝肠处置机制研究-药剂学专业论文.docxVIP

博士学位论文黄芪中异黄酮成分的药代动力学特征及肝 博士学位论文 黄芪中异黄酮成分的药代动力学特征及肝 肠处置机制研究 博士研究生：石剑 指导教师：刘中秋教授 摘 要 一、研究背景与目的 黄芪是一味著名的传统中药材，是200多种中药复方中的主要成分，具有保 肝、抗氧化、神经保护、促血管舒张等一系列药理作用。黄芪中己被分离并鉴 定出的成分超过100种，其中异黄酮是最主要的成分，并被认为是黄芪的主要 药理作用和治疗效果的物质基础。 传统中药材因为含有多种活性成分并且种类多样，导致其治疗作用的机制尚 未研究清楚。对中药中的活性成分的体内药代动力学特点的研究被作为预测药 物疗效和潜在毒性与优化给药剂量和避免副作用的有效手段。所以对传统中药 材中具有生物活性的主要成分进行药代动力学考察，对于其临床应用至关重要， 并且可以以此阐明其药理作用的机制。目前，有包括液质联用法在内的多种分 析方法用于定量检测口服含黄芪的复方水提物或黄芪醇提物后的动物血浆中的 标志化合物，但是相关方法均有或多或少的不足，并且尚无对黄芪水提物的体 内药代动力学特点进行研究。另外黄芪中的主要成分异黄酮属于黄酮类化合物， 因其结构中具有羟基，所以口服后会被肠道和肝脏的葡萄糖醛酸化转移酶 (UDP．glucuronosyltransferases，UGT)等II相代谢酶代谢为葡萄糖醛酸苷代谢 物。据认为，黄酮类化合物在体内的主要暴露形式是葡萄糖醛酸苷，并且有些 葡萄糖醛酸苷具有药理作用，通过药代动力学研究阐明黄芪中异黄酮的葡萄糖 醛酸苷的药代动力学特点有利于对黄芪的药理作用的进一步研究。 万方数据 中文摘要另一方面，除了代谢的作用外，在肠道中的吸收、水解、外排以及肠道循环 中文摘要 另一方面，除了代谢的作用外，在肠道中的吸收、水解、外排以及肠道循环 也参与黄酮类化合物的体内处置，影响其在系统和局部的生物利用度。一般认 为黄酮类化合物苷元通过自由扩散的形式吸收，而糖苷类物质由于极性大只能 先在肠腔中被乳糖根皮苷水解酶(1actase phlorizin hydrolase，LPH)水解为苷元 后才能吸收。也有研究认为苷类物质可以由肠细胞上的葡萄糖转运载体 (sodium．dependent glucose transporter，SGLT-1)转运至细胞内，再由细胞内的 B．葡萄糖苷酶水解酶水解脱糖。黄酮类化合物的代谢物极性变大，易被乳腺癌耐 药蛋白(BCRP)和多药耐药相关蛋白(MRPs)等排出细胞外。这些因素共同 构成生物利用度屏障，使多数黄酮类化合物未能开发成药物。 肠道循环是黄酮类化合物在体内肝肠处置的一类机制，包括肝肠循环、肠肠 循环和局部循环。肝肠循环(enterohepatic recycling)是指黄酮类化合物在肝细 胞中被代谢为葡萄糖醛酸苷后，随胆汁外排至肠腔中，随后在结肠中被肠道菌 群分泌的葡萄糖醛酸苷水解酶水解为苷元并被重吸收，形成整个循环。肠肠循 环(enteric recycling)是指黄酮类化合物在肠细胞中被代谢为葡萄糖醛酸苷后直 接外排至肠腔中，随后在结肠中被肠道菌群分泌的葡萄糖醛酸苷水解酶水解为 苷元并被重吸收，形成整个循环。局部循环(10cal recycling)是指被外排到肠腔 中的葡萄糖醛酸苷被小肠粘膜细胞分泌的葡萄糖醛酸苷水解酶水解为苷元，在 小肠中重吸收的过程。已有研究报道黄酮类化合物可同时参与这三种循环，肝 肠三循环可延长黄酮类化合物在肝肠中的滞留时间，提高其局部生物利用度并 有利于在肝肠中发挥药效。 毛蕊异黄酮葡萄糖苷(calycosin 7 0 p．glucoside，CG)是一种异黄酮苷类物 质，是黄芪中含量最高的活性成分，具有抗炎、抗氧化和神经保护作用。文献 报道CG及其苷元毛蕊异黄酮的生物利用度低，但两者的药代动力学特点及吸收、 处置机制尚不明确。 因此，本研究主要考察黄芪水提物及其主要活性成分CG的药代动力学特点， 并对CG在体内的吸收、水解和处置等机制进行深入研究。从而为黄芪的药理作 II 万方数据 博士学位论文用等研究提供理论依据。 博士学位论文 用等研究提供理论依据。 二、实验方法 1．黄芪水提物及主要成分CG的药代动力学研究 采用大鼠药代动力学模型，研究大鼠口服黄芪水提物后主要异黄酮的药代动 力学特点，并对CG以单体形式口服、静脉注射和腹腔注射后的药代动力学特点 加以考察。以液质联用仪检测大鼠血浆中的主要成分的含量，绘制药时曲线， 考察入血成分药代动力学特征并初步判断CG发生水解的器官。 2．CG在肠道中吸收水解特点的研究 采用大鼠在体肠灌流模型及一系列水解实验，研究CG在大鼠肠道中的吸收 和水解的特点。共同灌流LPH酶抑制剂，葡萄糖转运载体抑制剂等，考察异黄 酮苷类物质CG的吸收、水解是否受影响，并研究C