控制水稻叶片微黄基因fyl1的功能验证-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

分类号U 分类号 U D C． ．． ．．．．．．．．．． ．． 密彀 。 署黎 ≯声篝。 硕士研究生学位论文 控制水稻叶片微黄基因FYLl的功能验证 申请人： 王长茹 学 号： 2121255 培养单位： 生命科学学院 学科专业： 生物化学与分子生物学 研究方向： 植物生物技术与基因工程 指导教师： 姜恭好教授 完成日期： 2015年3月27日 万方数据 万方数据 万方数据 中文摘要水稻是我国及世界上许多国家最重要的粮食作物之一，影响水稻产量的因素 中文摘要 水稻是我国及世界上许多国家最重要的粮食作物之一，影响水稻产量的因素 众多，水稻叶片作为水稻光合作用的组要器官，叶色的变化会很大程度上影响水 稻的产量，同时叶色突变体也是研究功能基因组学、植物生理的重要材料，叶色 突变体还可以作为作物育种中的标记性状。 利用农杆菌转化法，ZH ll为受体的T-DNA插入突变体库，发现多种具有 代表性的突变体，在本实验以得到的一株突变为叶片微黄突变体∥f为材料，对 其功能进行验证，研究了影响水稻叶片叶色的一个基因。 1．通过田间观察表型，寻找到叶片微黄突变体∥』。田间调查发现该基因是由 一个隐性基因控制，并且突变体∥，的株高、分蘖、每穗实粒数较野生型均有降 低，尤其每穗实粒数，该突变体基本不结实。 2．通过TAIL—PCR获得T-DNA插入位点的旁邻序列，序列分析显示T-DNA 插入到水稻第一条染色体，M』基因的第5个外显子与第6个外显子之间，引起 基因不正常转录，从而导致表型突变，因此，构建了FYLl基因的过表达载体和 I冰A干涉载体验证其基因功能。 3．通过对转基因水稻的表型观察以及RT-PCR验证发现，耽J基因确实是一个 新的控制水稻叶片叶色相关基因。 关键词：水稻：FMJ；叶片：微黄基因；功能验证 万方数据 万方数据 黑龙江大学硕士学位论文Abstract 黑龙江大学硕士学位论文 Abstract Rice is of the most important food crop in China and many other countries： whose yield is affected by many factors．Rice leaf as the significant organ of photosynthesis，its color affected rice’S production largely．Besides，the mutant of leaf color is important to study genomics and plant physiology，and it also be used a marker character in crop breeding． Use of Agrobacterium transformation method，ZH 1 1 receptor,T-DNA insertion mutant library，which can find variety of mutants representative．In this experiment， we get faden yellow leaf mutantj乡ll material and study gene affecting rice leafs color by its functional verification． 1．Phenotype by field observation，to find yellow leaf mutant如11．Field survey found that the gene caused by recessive gene，and mutantJ夕ll’S height，tiller，per panicle were less than wild—type，especially the per panicle，mutant basically does not bear seeds． 2．Through TAIL-PCR，we got the flanking sequence of T—DNA insertion， sequence analysis showed that if the T-DNA is inserted between the fifth and the sixth exon，it cause gene transcription irregularly which lead to mutation phenotype． Therefore．building the FYLl genelS overexpression vector and the RNA