高中生物专题2课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.pptVIP

山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 专题2　微生物的培养与应用 基础自主梳理 核心要点突破 知能过关演练 山东水浒书业有限公司· 优化方案系列丛书 专题2　微生物的培养与应用 基础自主梳理 核心要点突破 知能过关演练 返回 课题2　 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 课标领航 1．举例说明什么是选择培养基，并研究培养基对微生物的选择作用。 2．设置重复组和对照组，对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数。 【重点】　选择培养基的作用。 【难点】　菌落数目的统计。 情境导引 德国著名化学家维勒是尿素的发现者。他在一次实验中，意外地发现在金属氰化物和氨水相互作用时，经温水加热，容器的底部出现了一些白色的沉淀物。一种强烈的好奇心驱使他要探个究竟，他紧紧抓住这种新的实验现象，反复实验研究，精心论证，经过近四年的艰苦努力，终于在1828年查明，金属氰化物和氨水相互作用，首先生成的物质是氰酸铵，氰酸铵经加热就会转化为尿素。 核心要点突破 知能过关演练 课题2　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 基础自主梳理 基础自主梳理 一、研究思路 1．自然界中目的菌株的筛选 (1)依据：根据它对___________的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实例：PCR技术过程中用到的耐高温的Taq DNA聚合酶，就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中分离到的。 生存环境 2．实验室中目的菌株的筛选 (1)理论依据 人为提供有利于____________生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)选择培养基 指在微生物学中，允许_____种类的微生物生长，同时_____或阻止其他种类微生物生长的培养基。 目的菌株 特定 抑制 3．统计菌落数目 (1)常用方法：___________法。 ①统计依据 a．当样品的__________足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个____。 b．通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。 ②注意事项：为保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 (2)其他方法：利用_________直接计数。 4．设置对照 目的是排除实验组中______________对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 活菌计数 稀释度 活菌 显微镜 非测试因素 二、实验设计 1．土壤取样 (1)土壤要求：富含_______、pH接近____且潮湿。 (2)取样部位：距地表约3～8 cm的土壤层。 2．样品处理 样品的___________直接影响平板上生长的______，选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证菌落数在30～300之间，便于计数。 有机质 中性 稀释程度 菌落 3．微生物的培养与观察 将培养基平板放于30～37 ℃温室中培养1～2天，每隔24 h统计一次______数目，最后选取数目稳定时的记录作为结果。 4．细菌的计数 当菌落数目稳定时，取同一_______下的至少3个平板进行计数，求出平均值，并根据所对应的公式计算出样品中细菌的数目。 菌落 稀释度 三、结果分析与评价 1．培养物中是否有杂菌污染以及选择培养基是否筛选出菌落 ______的培养皿在培养过程中没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染。牛肉膏培养基的菌落数目明显_____选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些菌落。 2．样品的稀释操作是否成功 如果得到了2个或2个以上菌落数目在30～300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。 对照 大于 3．重复组的结果是否一致 如果学生选取的是同一种土样，统计的结果应该_____。 四、操作提示 1．无菌操作 (1)取土样的用具在使用前都需要_____。 (2)应在火焰旁称取土壤，并在火焰附近将土样倒入烧瓶中，塞好棉塞。 (3)在_______土壤溶液的过程中，每一步都要在_____旁操作。 接近 灭菌 稀释 火焰 2．做好标记 本实验使用的______和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前就做好标记。 3．规划时间 对于耗时较长的生物实验，要事先规划时间，以便提高工作效率，在操作时更加有条不紊。 五、课题延伸 细菌合成的_____将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变___，可确定该种细菌能够分解尿素。 平板 脲酶 红 核心要点突破 选择培养基 选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离出所需要的微生物. 1．加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 2．加入高浓度的食盐溶液可得到金黄色葡萄球菌. 3．如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。 4．当培养