第三节氨基酸的生产工艺.pptx

第三节 氨基酸的生产工艺一、氨基酸的用途食品工业饲料工业医药工业化学工业农业目前生产的20多种氨基酸中，产量最大的是谷氨酸，约占总产量的75％，其次为赖氨酸（约为总产量10％），其他约占15％左右。从消费构成来看，食品行业的用量约占66％，饲料占30％，其他4％。二、氨基酸的生产方法生产氨基酸最早采用的生产方法。将蛋白质原料酸水解，然后从水解液中抽提出氨基酸。抽提法发酵法合成法酶法目前最常用的生产方法。利用微生物的作用直接将粮食原料经过发酵生产氨基酸；用化学合成的方法制造氨基酸。利用微生物产生的酶来制造氨基酸。名称制法名称制法L-缬氨酸发酵法、合成法L-半胱氨酸抽提法L-亮氨酸抽提法、发酵法L-酪氨酸抽提法L-异亮氨酸发酵法甘氨酸合成法L-苏氨酸发酵法DL-丙氨酸合成法DL-蛋氨酸合成法L-丙氨酸发酵法L-蛋氨酸合成法、酶法L-丝氨酸发酵法L-苯丙氨酸合成法L-谷氨酸胺发酵法L-色氨酸合成法、发酵法L-谷氨酸发酵法L-赖氨酸发酵法、酶法L-脯氨酸发酵法L-精氨酸发酵法、抽提法L-羟基脯氨酸抽提法L-组氨酸发酵法、抽提法L-鸟氨酸发酵法L-天门冬氨酰发酵法L-瓜氨酸发酵法L-天门冬氨酸酶法三、谷氨酸发酵机理1.谷氨酸发酵代谢途径 利用淀粉水解糖为原料通过微生物发酵生产谷氨酸的工艺，是最成熟、最典型的一种氨基酸生产工艺。2. 控制谷氨酸合成的重要措施 α-酮戊二酸氧化能力微弱，即α-酮戊二酸脱氢酶活力微弱。 三羧酸循环到达α-酮戊二酸时，即受到阻挡，把糖代谢流阻止在α-酮戊二酸的堰上，对导向谷氨酸形成具有重要意义。(2) 谷氨酸脱氢酶活性强 由于谷氨酸产生菌的谷氨酸脱氢酶比其它微生物强大得多，所以由三羧酸循环得到的柠檬酸的氧化中间物就不再往下氧化，而以谷氨酸的形式积累起来。(3) 细胞膜对谷氨酸的通透性高 谷氨酸的分泌可降低细胞内产物的浓度，消除了谷氨酸转化成其它代谢物的可能，降低了对谷氨酸脱氢酶的抑制，并使谷氨酸的生成途径畅通。3. 乙醛酸循环的作用 菌体生长期 由于三羧酸循环的缺陷——α-酮戊二酸氧化能力微弱，即α-酮戊二酸脱氢酶活力微弱，为了获得能量和产生生物合成反应所需的中间产物，需走乙醛酸循环途径。 乙醛酸循环产生的苹果酸仍可返回三羧酸循环。(2) 谷氨酸生成期： 封闭乙醛酸循环。(3) 如果CO2固定反应完全不起作用，丙酮酸完全氧化成乙酰CoA，则 3C6H12O6 2C5H9O4N 此时，理论糖酸转化率为54.4%.实际生产中，因发酵条件控制、菌体形成、微量副产物等，消耗一部分糖，实际糖酸转化率处于54.4%和81.7%之间。4. 黄色短杆菌中谷氨酸的代谢调节机制5 谷氨酸生产菌的育种思路 6. 谷氨酸发酵的收率 　在谷氨酸发酵时,糖酵解经过EMP及HMP两个途径进行,生物素充足菌HMP所占比例是38%,控制生物素亚适量的结果,发酵产酸期,EMP所占的比例更大,HMP所占比例约为26%。在糖质原料发酵法生产谷氨酸时,应尽量控制通过CO2固定反应供给四碳二羧酸;在谷氨酸发酵的菌体生长期,需要异柠檬酸裂解酶反应,走乙醛酸循环途径。菌体生长期之后,进入谷氨酸生成期,最好没有异柠檬酸裂解酶反应,封闭乙醛酸循环。在生长之后,理想的发酵按如下反应进行: C6H12O6+NH3+1.5O2 ──C6H9O4N+CO2+3H2O理论收率为81.7%。四碳二羧酸是100%通过CO2固定反应供给。若通过乙醛酸循环供给四碳二羧酸,则理论收率仅为54.4%,实际收率处于中间值。 7. 谷氨酸发酵中如何控制细胞膜的渗透性 7.1. 控制磷脂的合成：细胞膜磷脂含量低，有利于提高细胞膜通透性。 (1) 生物素缺陷型 生物素作为催化脂肪酸生物合成最初反应的关键酶乙酰CoA羧化酶的辅酶，参与了脂肪酸的合成，进而影响磷脂的合成。限制发酵培养基中生物素的浓度控制脂肪酸生物合成，从而控制控制磷脂的合成。当磷脂减少到正常值的一半时，细胞变性，谷氨酸向膜外渗出，积累于发酵液中。 (2) 添加表面活性剂在不饱和脂肪酸的合成过程中，吐温-60或饱和脂肪酸等抑制脂肪酸的合成。 (3) 油酸缺陷型油酸缺陷型突变株阻断了油酸的合成，丧失了脂肪酸生物合成的能力。 (4) 甘油缺陷型 甘油缺陷型菌株的遗传阻碍是丧失α-磷酸甘油脱氢酶，自身不能合成α-磷酸甘油和磷脂。 (5) 温度敏感突变株其突变位置发生在与谷氨酸分泌有密切关系的细胞膜的结构基因上，发生碱基的转换或颠换，这样为基因所指导释出的酶，在高温时失活，导致细胞膜某些结构的改变。 7.2. 控制细胞壁的合成：细胞壁合成不完全，细胞膜容易造成机械损伤和经不起内部渗透压的压力，造成膜的破坏，加大通透性。 对数生长期早期，添加青霉素或头孢霉素C。青霉素抑制细胞壁的后期合成。机制：抑制糖肽转肽酶，影响细胞壁糖肽的