褪黑素对大鼠下丘脑视交叉上核神经元自发放电的影响.pdfVIP

褪黑紊对大鼠下丘脑视交叉上枝神经元自点放电的影响 心哆 引 言 由视网膜，下丘脑视交叉上核(suprachiasmatic 和松果腺组成的神经内分泌系统是哺乳动物产生昼夜节律的机构 离体实验均已证实，SCN神经元的放电活动呈现周期为24小时的 昼夜节律性【5，e㈡81。光照信号(通过视网膜下丘脑束和膝间下丘脑束) 食、饮水、睡眠觉醒周期、体温和激素分泌等【111。将胎鼠SCN移 植到SCN已被损毁的大鼠脑内，可使已丧失的昼夜节律恢复【111。 哺乳动物的视网膜接受光照射以后，产生神经冲动，经包括SCN 在内的多突触神经通路的传递，最终到达支配松果腺的交感神经节 后纤维，抑制神经纤维末梢去甲肾上腺素的释放，进而减少松果腺 的合成和分泌受到抑制，黑夜MEL大量合成并分泌，相应地造成 3,141。 血中MEL水平夜涨昼落的变化[1 哺乳动物松果腺细胞合成的MEL，首先进入细胞周围的毛细血 管网，经全身循环后，被脉络丛组织转运到脑脊液，脑脊液中MEL 可被室管膜细胞摄取，并转运到SCN，通过SCN中相应受体发挥 作用Ⅲ】丫 √ 受体，它具有可逆性结合，可饱和性，高亲和力和低结合容量等特 征。ML一1受体属于与G蛋白偶联的有7个跨膜区段的受体家族， Q 通过激活G蛋白(G 褪黑素对大鼠下丘脑税交兰竺竺竺兰皇兰兰兰竺竺竺 一二!!!L ——●—————●——-———————————_——————_—————————-————————————_———_—————————————一 6,1 等[1 71。 一1／松果腺可能对SCN神经元的MEL受体的合成有影响，松果腺 受体下调U 分别位于光／暗和暗／光转换期。MEL受体在主观白天数量较高，SCN 神经元对MEL反应性高；在主观黑夜受体较少，对MEL反应性低I”’ 2 0l。 松果腺摘除能消除仓鼠SCN对MEL反应性的昼夜节律，这时 对MEL起反应的神经元比例减少，对MEL起反应的阈值提高[41。 大量的实验研究表明，MEL以剂量依赖的方式影响大鼠SCN神 反应的昼夜节律消失，且在主观黑夜对MEL反应性增高；ML一1受 本文以大鼠为研究对象，在以前的研究基础上，采用在体细胞外 记录SCN神经元单位放电技术，观察消除内源性MEL后在白天和 黑夜所记录的SCN神经元单位放电的变化，并探讨MEL作用的受 体机制，为MEL的临床应用提供理论依据。 褪黑素对犬鼠下丘脑视交叉上柱神经元自发放电的影响 实验材料 一．实验动物 80一250 雄性Wistar大鼠，体重1g，由苏州大学生命科学院实 验动物中心提供。 二．主要仪器 1．微电极放大器 (MEZ一8201，日本) 2．前置放大器 (FZG一1A，南京) 3．二线示波器 (SBR一1A，汕头超声电子仪器厂) 4．后置放大器 (SMUP一2，上海嘉定教学仪器厂) 5．计算机 (386DX，含电生理实验系统软件一套) 6．微电极操纵器 (PF一51，日本) 7．立体定位仪 (SN一3，日本) 8．冰冻切片机 (上海医疗器械四厂) 9．光电分析仪 (TG328A，上海分析天平厂) 10．显微镜 (XSA一5D，梧州市光学仪器厂) 11．牙科电钻 (307—6，上海齿科医械厂) 三．主要试剂 (1)Melatonin (Sigma公司1 (2)Luzindole (Sigma公司) (3)盐酸哌唑嗪