课件：第七章-芳香胺类药物的分析2.pptVIP

含量测定 (Assay) 3、比色法 测定原理： 注意：由于偶合剂（N-(1-萘基)-乙二胺）与亚硝酸也能显色干扰测定，所以在重氮化后，应加入氨基磺酸铵分解剩余的亚硝酸。 比色法含量测定 例：盐酸克伦特罗栓（Chp2005） 【含量测定】 对照品溶液的制备 精密称取盐酸克仑特罗对照品适量，加盐酸溶液 (9→100)制成每1ml 中含7.2μg的溶液。 供试品溶液的制备 取本品20粒，精密称定，切成小片，精密称取适量（约相当于 盐酸克仑特罗0.36mg），置分液漏斗中，加温热的氯仿20ml使溶解，用盐酸溶液(9→ 100)振摇提取3 次(20ml、15ml、10ml) ，分取酸提取液，置50ml量瓶中，用盐酸溶液(9→ 100)稀释至刻度，摇匀，滤过，收集续滤液，即得。 测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各15ml，分置25ml量瓶中，各加盐酸溶 液(9→100)5ml 与0.1 ％亚硝酸钠溶液1ml ，摇匀，放置3 分钟，各加0.5 ％氨基磺酸 铵溶液1ml ，混匀，时时振摇10分钟，再各加0.1 ％盐酸萘乙二胺溶液1ml,混匀，放置 10分钟，用盐酸溶液(9→100)稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅳ B），在 500 nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。 含量测定 (Assay) 4、提取酸碱滴定法 原理：溶解性－盐酸盐或硫酸盐可溶于水，游离碱不溶于水，溶于有机溶剂。 方法：供试品溶于水或矿酸，加入适量碱性试剂使药物游离，用适当的有机溶剂提取，将提取液蒸干，残渣中加中性乙醇溶解，用标准酸滴定液直接滴定（或在提取液中加定量过量的标准酸滴定液，蒸去有机溶剂后，再用标准碱滴定液回滴定）。 例：硫酸苯丙胺→加水溶解→加氢氧化钠试液8ml →加氯化钠使饱和→乙醚多次提取→合并乙醚液→精密加硫酸滴定液（0.05mol/L）25ml振摇→低温蒸去乙醚→放冷至室温→加甲基红指示液2滴→用氢氧化钠（0.1mol/L）滴定。每1ml硫酸滴定液（0.05mol/L）相当于18.42mg的C18H26N2·H2SO4。 含量测定 (Assay) 5、荧光分光光度法 基本原理：肾上腺素含有的邻苯二酚结构，被弱氧化剂氧化，生成肾上腺素红，发生转位为N-甲基-3,5,6-三羟基吲哚（THI）。(Tri- Hydroxyl- Indole-) 本法还可用于测定微量儿茶酚胺类药物。 含量测定 (Assay) 6、高效液相色谱法 高效分离，高灵敏度和高选择性－可用于制剂常规分析，临床药物监测和体内药物动力学研究。 例1：重酒石酸去甲肾上腺素注射液分析 色谱条件：色谱柱：ODS（即C18） 流动相：0.14%庚烷基磺酸钠溶液－甲醇(65:35)，用磷酸调pH至3.0±0.1，流速：1.0ml/min 检测波长：280nm 测定方法：精密量取本品适量（约相当于重酒石酸去甲肾上腺素4mg），置25ml量瓶中， 加醋酸溶液（1→25）稀释至刻度，摇匀，取2μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取重酒石 酸去甲肾腺素对照品适量，精密称定，加醋酸溶液（1→25）制成每1ml中含0.16mg的溶液， 同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。 含量测定 (Assay) 6、高效液相色谱法 例1：HPLC-EChD（电化学检测）法测定血浆中儿茶酚胺类药物 色谱条件：色谱柱：ODS型键合相 流动相：离子对试剂 检测器：电化学检测器 供试品溶液的制备：氧化铝吸附－洗脱 含量测定 (Assay) 7、衍生化气相色谱法 例：盐酸芬氟拉明 (fenfluramine hydrochloride) 由于结构中的仲胺基极性极强，使得气相色谱法测定值波动较大，因此将样品溶解后经碱化乙酸乙酯提取，加入内标，提取液用三氟乙酸酐进行酰化衍生化，将衍生化产物在5%SE-30(甲基硅橡胶)的色谱柱上分析，用FID检测器检测。 第三节 芳氧丙醇胺类药物 典型药物： 氧烯洛尔 (Oxprenolol, 别名烯丙氧心胺，心得平，Tracosal, Trasacor, Trasieor ) －β肾上腺素受体阻滞药 盐酸卡替洛尔 (Carteolol hydrochloride) －β受体阻滞药 鉴别反应 (identification) 化学鉴别 氧烯洛尔：取本品0.1g，加乙醇2ml溶解后，滴加0.1mol/L高锰酸钾溶液1ml，振 摇数分钟，高锰酸钾颜色消褪，并产生棕色沉淀。 盐酸卡替洛尔：取本品约0.1g，加水5ml使溶解，加硫氰酸铬铵试液5滴，即生成淡红色沉淀。 紫外吸收峰特征 氧烯洛尔水溶液 (40μg/ml): 在275nm 的波长处有最大吸收。 盐酸卡替洛尔 (8μ