课件：甾体激素类药物分析.ppt

为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各1ml，分别置25ml量瓶中，各 精密加异烟肼溶液（异烟肼75mg，盐酸0.1ml，加甲醇溶解并稀释至100ml）20ml，摇匀，置60℃水浴中保温1小时， 冷却，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照紫外 -可见分光光度法(附录Ⅳ A)，在420nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得。 3. 讨论 （1）溶剂的选择 无水甲醇或无水乙醇 （2）酸的种类 HCl、H2SO4、HAc均可，且酸与异烟肼的摩尔比为2:1时可获得最大吸收。 （3）水分、温度、光线和氧的影响 水分使反应逆转，温度使反应 加快，具塞玻管中反应，光线和氧不影 响。 （4）关于反应专属性 在一定的反 应条件下，只有C3-酮基起反应，故本 法对△4-3-酮甾体具有专属性。 五、Kober反应比色法 Kober反应是指雌激素与硫酸-乙醇反应呈色，在515nm附近有最大吸收。可用于雌激素的比色法测定。 复方炔诺孕酮滴丸 Ch.P（2005） 【含量测定】取本品10丸，除去包衣后，置20ml量瓶中，加乙醇约12ml，微温使溶散后，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取炔诺孕酮与炔雌醇对照品适量，精密称定，用乙醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含炔诺孕酮0.15mg与炔雌醇15?g的溶液作为对照品溶液。 炔雌醇 精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置具塞锥形瓶中，于冰浴中冷却30秒钟后，各精密加硫酸-乙醇（4:1）8ml（速度必需一致），随加随振摇，加完后继续冷却30秒钟，取出，在室温放置20分钟，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A）。在530nm的波长处分别测定吸光度，计算，即得。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 口服避孕药 第二节 鉴别试验 一、化学鉴别法 1. 与强酸的呈色反应 母核反应 常用与硫酸的呈色反应 醋酸泼尼松 Ch.P（2005） 【鉴别】（2）取本品约 5mg，加硫酸 1ml使溶解，放置 5分钟，即显橙色；将此溶液倾入 10ml水中，即变成黄色，渐渐变为蓝绿色。 2. 官能团的反应 （1）酮基的呈色反应 黄体酮 Ch.P（2005）【鉴别】 取本品约0.5mg，置小试管中，加异烟肼约1mg与甲醇1ml溶解后，加稀盐酸1滴，即显黄色。 （2）C17位 ?—醇酮基的反应 还原性 肾上腺皮质激素+碱性酒石酸铜 →Cu2O↓（红色） 醋酸泼尼松 Ch.P（2005） 【鉴别】（1） 取本品约1mg，加 乙醇2ml使溶解，加10%氢氧化钠 溶液2滴与氯化三苯四氮唑试液 1ml，即显红色。 醋酸去氧皮质酮 Ch.P（2005） 【鉴别】 （1）取本品约5mg，加乙醇 0.5ml溶解后，加氨制硝酸银试液 0.5ml，即生成黑色沉淀。 倍他米松 Ch.P（2005） 【鉴别】（1）取本品约10mg，加甲醇 1ml，微热溶解后，加热的碱性洒石酸 铜试液1ml，生成砖红色沉淀。 （4）酚羟基的呈色反应 （3）甲酮基的呈色反应 雌激素＋重氮苯磺酸→红色 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 （5）炔基的沉淀反应 白色炔银↓ （6）卤素的反应 地塞米松磷酸钠 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显有机氟化物的鉴别反应（附录Ⅲ） 醋酸酯→醋酸→ 乙酸乙酯（香气） 戊酸酯→戊酸（臭气） 己酸酯→己酸（臭气） （7）酯的反应—水解产物的反应 醋酸地塞米松 Ch.P（2005） 【鉴别】（2）取本品50mg，加乙 醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中 加热5分钟，放冷，加硫酸溶液 （1→2）2ml，缓缓煮沸1分钟，即 发生乙酸乙酯的香气。 己酸羟孕酮 Ch.P（2000） 【鉴别】（2）取本品约50mg，加 醇制氢氧化钾试液2ml，置水浴中 加热 5分钟，加水3ml，蒸去乙醇， 放冷，加硫酸溶液（1→10）2ml， 置水浴中加热，即发生己酸的特臭. （二）制备衍生物测定熔点 （四）UV （五）IR （六）TLC （七）HPLC 第三节 特殊杂质检查 一、有关物质（其他甾体）的检查 甾体激素类药物多由其他甾体化合物经结构改造而来，易引入与标示甾体激素药物结构不同、生理活性不同的其他甾体化合物称为“有关物质” ，包括原料、中间体、异构体、降解产物等 1. HPLC Ch.P（2005） 一般采用不加校正因子的主成分自身对照法 2. TLC Ch