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研究生实验技能培训－－分子生物学实验常用仪器介绍 实验中心 种类 台式（实验室用）PH计 便携式（实验室用）PH计 工业用PH计 多功能（实验室用）PH计 工作原理 pH值通常用电位法测量 可分为电极部分和电计两部分。 电极的主要作用就是将被测溶液的酸碱性等信号转化为电位值。 电计的作用就是将电极转换的电位值等信号进行放大处理并指示(显示)出pH值等数据。 pH计的校正 生产厂家一般提供两瓶标准溶液 一瓶pH值等于6.86（混合磷酸盐的标准缓冲溶液），用于标定仪表零点。 一瓶pH等于4（邻苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液），用于标定仪表的信号输出斜率。 pH计的使用注意事项 测试前，用蒸馏水冲洗电极，洗去保护液。 测量电极上的玻璃探头，小心碰撞，避免破碎。 完成测试后，用蒸馏水冲洗电极，吸干，套上套管，关闭电源。 METTLER TOLEDO AG285 天平 天平种类 分析天平 电子天平 精密电子天平 托盘天平 砝码 工作原理 ?天平是称量物体质量的衡器。 常用天平都采用单杠杆结构，运用“杠杆平衡时加在等力臂上的力相等”这一原理制成。 电子天平是用电磁力平衡被称物体重力的天平。 基本概念 全称量 天平所能称量的最大质量值（满载值），常以“克”（g）为单位表示。? 感量 使天平指针从平衡位置转到刻度盘一分度所需的最大质量。 因此，感量也叫做“分度值”，常以“毫克”（mg）为单位表示。（e, d) 这一数值愈小，天平就愈灵敏。 Max: 81g/210g d = 0.01 mg/0.1mg ? 如何选择天平 用一台实际标尺分度值d为1mg，检定标尺分度值e为10mg，最大称量为200g的Mettler电子天平，用来称量7mg的物体，这样是不能得出准确结果的。 在《JJG98-90非自动天平试行检定规程》中规定，最大允许误差与检定标尺分度值“e”为同一数量级，此台天平的最大允许误差为1e，显然不能称量7mg的物体 。 倒置生物显微镜 显微镜的分类 按其观察对象和光路结构可分为 正立、倒置和体视显微镜 按其光学性质可分为明场和暗场 暗场又包含相差、霍夫曼、荧光和偏光 暗视野显微镜 在培养细胞活体观察中以倒置暗场为主 一般暗视野显微镜虽看不清物体的细微结构，但却可分辨0.004um以上的微粒的存在和运动，这是普通显微镜(最大的分辨力为0.2um)所不具有的特性，可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。 细胞培养中显微镜的运用 细胞数量记录 细胞形态观察 细胞动力学记录 NIKON TE2000-U 倒置荧光显微镜 工作原理 荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650入或紫蓝光4200入)作为激发光，激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，再通过物镜和目镜的放大进行观察。 基本构造 由普通光学显微镜加上一些附件： 荧光光源 激发滤片 双色束分离器 阻断滤片等 荧光显微镜分类 透射式 汞灯光源 激发滤色镜 吸收滤色镜 暗场聚光镜 主要用途 1 观察标本中的自发荧光物质或以荧光素染色或标记的细胞和结构 2 标本中的荧光物质在紫外线激发下产生各种颜色的荧光，借以研究该荧光物质在细胞和组织内的分布。 3 细胞内的某些成分可与荧光素结合而显荧光，如溴化乙锭与吖啶橙可与DNA综合，进行细胞内DNA含量测定。 4 荧光显微镜更广泛用于免疫细胞化学研究，即以异硫氰酸或罗丹明等荧光素标记抗体（一抗或二抗），用该标记抗体直接或间接地与细胞内的相应抗原结合，以检测该抗原的存在与分布。 免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。 荧光的种类 自发荧光（固有荧光） 二次荧光 组织中的自发性荧光物质 神经细胞和心肌细胞等内的脂褐素呈棕黄 色荧光 肝贮脂细胞和视网膜色素上皮细胞内的维 生素A呈绿色荧光 某些神经内分泌细胞和神经纤维内的单胺 类物质（儿茶酚胺、5－羟色胺、组胺 等）在甲醛作用下呈不同颜色的荧光 组织内含有的奎宁、四环素等药物也呈现一 定的荧光。 绿荧光目标蛋白测定---监测细胞内蛋白位移 使用注意事项 1．打开灯源，超高压汞灯要预热几分钟 才能达到最亮点。 2．使用中应注意： 末装滤光片不要用眼直接观察，以免引 起眼的损伤。 3．高压汞灯关闭后不能立即重新打开，需 经5分钟后才能再启动，否则会不稳 定，影响汞灯寿命。 Gene pulser X cell电穿孔系统 工作原理 电穿孔是功能强大的将核酸、蛋白及其它分子导入多种细胞的高效技术。 通过高强度的电场作用，瞬时提高细胞膜的通透性，从而吸收周围介质中的外源分子。 这种