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研究生学位论文选题报告
研 究 课 题 毛细管电泳电化学发光
在抗肿瘤药物中的研究与应用
研 究 生 姓 名 徐 泉 秀
所在教研室名称 分析教研室
攻 读 学 位 硕士研究生
导 师 姓名职称 邓必阳教授
论 文 工 作 的
起 止 时 间 2007年9月至2009年1月
桂林工学院研究生处制
选题依据(选题来源,研究意义,国内外研究现状、水平和发展趋势)
(1)选题来源:
课题来源于国家自然科学基金和广西自然科学基金。
(2)研究意义:
随着我国人口老年化及环境的恶劣变化,患肿瘤的病人越来越多,因此社会对治疗肿瘤病的药的需求在不断的扩大和更新,所以肿瘤药物分析在临床、药代动力学及药物开发研究中具有重要地位,随着肿瘤药物分析的不断发展,它不但要求分析结果准确可靠,而且要求分析方法简单快速,尤其是对痕量和微量药物分析。将毛细管电泳(CE)分离电致化学发光(ECL)检测联用是近年来发展的一种新方法 (简称CE-ECL)。该法不仅具有CE的快速高效分离、样品用量少等特点,又发挥了ECL高选择性、高灵敏的优点,因此有良好的药物分析和临床分析应用价值。CE-ECL联用技术作为一种高效、快速、灵敏的分析方法恰好能满足上述要求,将其用于肿瘤药物分析不仅具有理论意义,而且还有重要的实用价值。在优化的条件下,三联吡啶钌CE-ECL分离检测体系体现了选择性好、灵敏度高、重现性好、分析时间短、线性关系好等优良性能。应用该方法在 几分钟内可成功地测定代谢液中的抗肿瘤药物,该技术可以作为定量分析代谢液中抗肿瘤药物的有力工具。
(3)国内外研究现状、水平和发展趋势:
毛细管电泳(CE),是近年来发展最快的新兴研究领域之一,泛指在极细的毛细管内实现的一类电泳技术。与传统电泳相比,根本区别在于它使电泳过程在散热效率极高的毛细管内进行,从而确保引入高的电场强度,全面改善分离质量。
最早提出毛细管电泳构想的首推瑞典科学家Hjerten,他于1967年的一篇论文中最先提出了一种以内壁有甲基纤维涂层,内径为3mm 的石英玻璃管为分离通道的高电场分离方法,这就是毛细管电泳的雏形。Mikkers 等(1979)用内径为200μm 的PTFE 管,以区带电泳模式分离了16 种有机酸,获得了小于10μm 板高的电泳分离效率,为毛细管电泳研究做了开创性的工作,只可惜没有引起当时分离科学界的足够重视。Jorgenson(1981)在75μm 内径的毛细管内用高电压成功分离了多种丹酰化氨基酸并得到了前所未有的高达400000/m 的理论塔板数,他们的理论工作进一步指出,在考虑分子扩散为区带增宽的唯一因素时,生物大分子的分离会在短时间内获得惊人的效率。正是他们出色的实验和理论工作轰动了分离科学界的发展,成为CE 历史上划时代的里程碑。Hjerten等(1983)提出了毛细管凝胶电泳(CGE)。Terabe 等(1984)发展了毛细管胶束电动色谱(MECC)。Hjerten(1985)建立了毛细管等电聚焦电泳(CIEF),多种分离模式的提出扩大了CE 的应用范围。1988-1989年间,具有在线检测和自动进样功能的CE 仪器开始推向市场,CE 定量分析性能得到显著提高,逐步成为各学科实验室中一种有力的分析手段,使其在无机离子、有机分子、药物、临床物质分离分析中得到广泛的应用,并逐渐应用于生命科学DNA 测序、蛋白质、多肽、核苷酸和氨基酸等生物分子的分离分析。
20世纪70年代,有关电化学发光(ECL)在分析科学中应用的文献报道较少,80年代初期开始逐渐增多,其中包括ECL 流通池和探针的设计、ECL 与流动注射分析、高效液相色谱以及毛细管电泳等微型分析系统的联用。目前在分析科学中ECL 主要用于被测物含量的分析,另外,ECL作为一个电化学过程,可以被用作研究电化学过程的工具,还可以作为诊断工具研究电极表面条件,用于表面化学研究,特别是研究组装、吸附化合物膜的性质,利用ECL聚合物制作发光器件,利用ECL影像技术研究聚合物在电极表面沉积、涂覆后的多相性和覆盖度,研究电化学和电化学机理以及表面相互作用。在电极总电流无法区分的条件下,ECL也可以用来确认电极上发生众多反应中的某个反应。而三联吡啶钌(Ru(bpy)3 2+)是目前研究最多和应用较广泛的一种化合物。
由于Ru(bpy)32+ ECL具有很多优点,成为几个ECL体系在实际分析中应用最多的化合物,Ru(bpy)3 2+ECL作为一种检测方法,常用于FIA,HPLC等流动体系检测物质含量,可检测草酸盐以及含氮的物质;与一些可利用β-烟酰氨腺嘌呤辅酶将NAD
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