唐古特大黄水提取物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及机制.docxVIP

唐古特大黄水提取物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及机 制 黑龙江省哈尔滨市香坊区成高子镇屮心卫生院150039 摘要：目的研究分析唐古特大黄水提取物的舒血管作用及其机制。方法采用大 鼠离体主动脉环灌流模型，观察唐古特大黄水提取物对苯肾上腺素预收缩内皮完 整的血管环和去内皮血管环的舒张作用。应用一氧化氮合成酶抑制剂左旋硝基精 氨酸甲酯和鸟背酸环化酶抑制剂亚甲蓝研究唐古特大黄水提取物舒张血管作用 的影响。结果唐古特大黄水提取物对离体大鼠胸主动脉环具有非内皮依赖性的舒 张作用，分别用一氧化氮合成酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯和鸟廿酸环化酶抑制 剂亚甲蓝预处理对唐古特大黄水提取物舒张作用没有明显影响。在无钙缓冲液中, 唐古特大黄水提取物对血管收缩有抑制作用。结论唐古特大黄水提取物对离体 大鼠胸主动脉环的舒张作用具有非内皮依赖性，其机制与抑制血管平滑肌细胞内 质网储存钙的释放有关。 关键词：唐古特大黄；主动脉，胸；血管舒张 大黄是蓼科多年生宿根草本植物，我国主要分布于青海、甘肃等西 北地区和四川、云南等西南地区［1］。2010年版《屮国药典》收载的大黄有3种 即唐古特大黄(RheumTanguticum Maxim) 掌叶大黄(Rheum palmatum Linne) 和药用大黄(Rheum officinale Ball),其主要有效成分有大黄素、大黄酸、大黄酚、 大黄素甲醯、芦荟大黄素等。大黄味苦寒，具有泻下通便、主下淤血、清热解毒、 调屮和食、破瘀通经等功效，其药理作用主要有调节胃肠功能、抗心律失常、抗 心肌缺血、降低血脂、降低血压、抗病原微生物、抗肿瘤、保护心脑血管、保肝 及抗衰老等作用［2, 3, 4］。另有报道大黄素和大黄酚能舒张由肾上腺素和组胺 诱导的豚鼠胸主动脉；番泻貳A和小剂量大黄素舒张兔主动脉；没食子酸(GA) 通过抑制内皮NO生成舒张血管，但对于唐古特大黄对离体血管舒张作用及机制， 目前尚未见报道。本实验釆用大鼠离体胸主动脉环灌流模型，探讨了唐古特大黄 水提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用及其作用机制。 1材料 准确称取唐古特大黄100g,加入蒸惚水1L,在80°C温度煮沸3h,过滤 减压浓缩干燥而得10.57 g粉末。苯肾上腺素(phenylephrine, PE)、乙酰胆碱 (acetylcholine, Ach)^ 左旋硝基精氨酸甲酯(Nomega;-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)和亚甲蓝(methylene blue, MB)均为美国 Sigma 公司产品(Sigma Chemical Co., St.Louis, MO, USA)。其余试剂为市售分析纯。本实验用 Sprague-Dawley大鼠，雄性，体重250-300g,由延边大学实验动物科提供。生 理性营养液成分(Krebrsquo;s 营养液)(mmol.L-1)为 NaCI 115.0、KCI 4.7 CaCI2 2.5、MgCI2 1.2 NaHCO3 25?0、KH2PO4 1.2 和葡萄糖 10.0 组成。pH 值为 7.4。 SQG?4型四腔器官浴槽系统、HSSJ (B)型恒温浴槽及RM6240BD型多道生理信 号采集处理系统均为成都仪器厂产品。 2方法与结果 2.1大鼠离体胸主动脉环的制作 腹腔注射给予大鼠3%戊巴比妥钠 50mg.kg-l麻醉人鼠后，打开胸腔，分离胸主动脉。将取下的胸主动脉放入4°C 的Krebrsquo;s营养液中，小心去除血管周围的脂肪及结缔组织，把动脉剪成4 mm宽的血管环，避免过度牵拉，以防损伤内皮。根据实验需要，去除血管内皮 吋，使用小蹑子轻轻地磨擦血管环内表面以去除内皮细胞。将血管环悬挂于经 37 °C预热容量为20 mL Krebrsquo;s营养液的浴槽内，一端固定，另一端通过 张力换能器连接RM6240BD型多道生理信号采集处理系统。在持续通以95%02 和5%CO2混合气体，将静息张力逐渐调节至2.0go在37 °C下稳定lh,期间每 15min换液1次。 检验血管内皮活性:待动脉环稳定后，换液1次，浴槽中加入PE 1.0mu;mol.L-l, 收缩达峰值15min后，力口入Ach 1.0 mu;mol 1-1,若加Ach后使PE预收缩的血 管舒张60?90%,可认为内皮完整；反之，则认为内皮去除。 2.2统计学处理 实验数据以均数plusmn;标准偏差(Xplusmn;s)表示, 并采用t检验、ANOVA法进行统计学分析。 2.3桂枝醇提取物对大鼠离体胸主动脉环的舒张作用 取雄性大鼠40只, 随机分为5个组，即对照组、内皮完整唐古特大黄水提取物大、小剂量组和去内 皮唐古特大黄水提取物大、小剂量组，每组各为8只。剖取各组大鼠胸主动脉环， 加入：L.0mu