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第四章1培养基 培养基是人们提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的按一定比例配制的多种营养物质的混合物.主要由碳源、氮源、无机盐和生长因素等组成。 发酵培养基的一般要求 营养物质组成比较丰富,浓度恰当,能满足菌体生长繁殖和代谢的要求,尤其要满足产物的特殊要求. 采用原料理化性质相对稳定,彼此之间不能产生化学反应. 黏度适中,不影响通气与搅拌的效果,有利于产物的分离和废物处理. 具有适当的渗透压. 大生产中选用的原材料尽量因地制宜,来源丰富,质优价廉. 水 直接参与代谢反应； 菌体所需营养都是溶解水中被吸收的； 菌体的分泌、排泄等作用需水做介质； 水的比热较高，有效吸收发酵热，保持细胞内温度不骤然生高； 特殊产品发酵对水有特殊要求（啤酒等）。 培养基的组成(碳) 碳源:凡是用于构成微生物和代谢产物中碳素的营养物质均称为碳源.碳在微生物含量很高,约占细胞干物质的50%. 功能:构成菌体细胞,代谢产物的碳素和能量. 常用的碳源 葡萄糖：碳源中最易利用的糖，几乎所有的微生物都能利用葡萄糖。 过多的葡萄糖会过分加速菌体的呼吸，导致供氧不足，使某些中间代谢物不能完全氧化，积累于菌体或培养基中，改变环境的PH值，影响发酵。 当葡萄糖与其它碳源共存时（如山梨醇），注意葡萄糖效应（二次生长现象）。 常用的碳源 糖蜜：蔗糖生产时的结晶母液，是糖厂副产物。糖蜜营养丰富，富含糖（主要是蔗糖）、氮素、无机盐和维生素等。它是发酵工业物美价廉的原料。 淀粉、糊精等：发酵工业最常用的碳源之一。它们一般都需要水解成单糖才能被利用吸收。因此可以克服葡萄糖代谢过快的弊病。 脂肪:脂肪具有碳源和消泡的双重功能.菌体利用脂肪作碳源时需要活跃的脂肪酶,并且供给更多的氧. 其它碳源:有机酸﹑醇和碳氢化合物等. 氮源 氮源是指构成微生物细胞和代谢产物中的氮素的营养物质.它是微生物发酵常用的原料之一.其主要功能是构成微生物细胞和含氮代谢物,碳源不足时也可补充碳源(有机氮). 常用氮源分有机氮和无机氮两大类. 有机氮源 有机氮源除含有丰富的蛋白质肽类游离的氨基酸外,还含少量的糖类﹑脂肪﹑无机盐和生长因子等. 有机氮源中含有氨基酸和其它有机氮化合物中的不同结构碳架,可直接用来合成生命所需要的蛋白质和其它细胞物质.因此微生物在有机氮源的培养基中常表现出生长旺盛﹑菌丝增长快. 常用有机氮源:豆饼粉﹑花生饼粉﹑鱼粉﹑蛋白胨﹑玉米浆等. 尿素是成分单一有机氮源. 无机氮源 常有的无机氮源有:铵盐﹑硝酸盐和氨水等.微生物对它们的吸收利用较快. 无机氮源被迅速利用后常引起PH变化: (NH4)SO4→2NH3+H2SO4 NaNO3+4H2→NH3+2H2O+NaOH 无机氮源 反应中生成的NH3被菌体利用后,培养液中留下了酸性或碱性物质.经微生物代谢后形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质,(如(NH4)SO4),形成碱性物质的无机氮源叫生理碱性物质.如NaNO3. NH3是一种常用的无机氮源,它还能调节PH值. 无机盐及微量元素 发酵微生物的生长代谢都需要无机盐和微量元素,如:磷﹑硫﹑铁﹑镁﹑钙﹑锌﹑钾等.许多金属离子对微生物生理活性的作用与其浓度有关,低浓度时常呈现刺激作用,高浓度却表现抑制作用.最适浓度要依据菌种的生理特性和发酵工艺来确定. 常用微量元素 磷:是核酸﹑核蛋白和ATP等物质的重要组分,也是许多酶的活性调节剂.磷酸是发酵生产中的限制性营养成分.常用的磷酸盐有磷酸二氢钾﹑磷酸氢二钾及其钠盐. 铁:铁是菌体细胞色素﹑细胞色素氧化酶和过氧化物酶的组成成分,是生命活动必需元素之一;同时对多种代谢产物的生物合成有较大影响. 常用微量元素 锌﹑镁﹑钴是某些酶的辅酶或激活剂.微量的锌对青霉素发酵有促进作用,过量时呈抑制作用.锌是链霉素发酵的必需元素,微量的锌能促进菌体生长和产物的形成.镁除了是一些酶的激活剂外,还能提高卡那霉素﹑新霉素﹑链霉素产生菌对自身产物的耐受性. 常用微量元素 钠﹑钾﹑钙虽不是微生物细胞的构成成分,但仍是微生物代谢中不可缺少的元素.钠有维持细胞渗透压的功能,钾离子能影响细胞膜的透性.钙离子有调节细胞透性的作用,还能调节培养液中的磷酸盐的含量. 前体 前体是指某些化合物加入发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成中结合到产物分子中去，其自身结构变化不大，产物的产量却因此有较大提高。如：青霉素发酵时加入苯乙酸及其衍生物青霉素G的产量。 前体用法 前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07% 前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化， 流加也有利于提高前提的转化率