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改进的细粒棘球蚴生发细胞分离培养方法与鉴定邹晓毅：女，汉族，医学博士，副教授，研究方向为医学寄生虫 邹晓毅：女，汉族，医学博士，副教授，研究方向为医学寄生虫病的预防和治疗 ?国家自然科学基金资助（No。 通讯作者:叶彬。E-mail:yebina@. Tel:023邹晓毅1，2 王俊安1 周潜涛1 张潞渝1，2 韩秀敏3 杨永海3 叶彬 1，2 (1重庆医科大学病原生物学教研室，2重庆医科大学肿瘤与分子医学中心，重庆 400016；3青海省地方病预防控制所，青海 811602) 【提要】 目的： 探讨细粒棘球蚴生发细胞原代培养的改进方法。方法：剪碎自然感染的绵羊棘球蚴包囊组织，用胶原酶与胰蛋白酶等比混和液消化解离，对获得的细胞以显微镜、电镜以及免疫荧光试验方法进行形态学研究及鉴定。结果：分离出足量细胞进行体外培养且细胞具有生发细胞样形态和免疫特征。 结论：改良的胶原酶消化法是一种简单有效的生发细胞分离培养方法。 【关键词】细粒棘球绦虫；棘球蚴；生发细胞；原代细胞培养 【中图分类号】R383.33 Modified Primary Culture and Identification of Germinal Cells from Hydatids of Echinococcus granulosus ZOU Xiao-yi1，2，WANG Jun-an1 ZHOU Qian-tao1，2，ZHANG Lu-yu1，2， HAN Xiu-min3, YANG Yong-hai3, YE Bin1，2 ?? (1Department of Pathobiology, 2Center for Molecule Medicine and Tumor, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China) (3Qinghai Institute for Endemic Disease Prevention and Control, Qinghai 811602, China) 【Abstract】 Objective： To explore a modified primary culture method of germinal cells of hydatid of Echinococcus granulosus. Methods: The broken hydatid cysts from naturally infected sheep were digested by mixed collagenase-parenzyme and the cells were identified by light microscope combined with electron microscopy and IFA. Result: Satisfying cells were obtained for culture in vitro and the cells showed characters of germinal cells of hydatids of Echinococcus granulosus both in morphology and immunology. Conclusion：The modified collagenase-digesting method could produce effective germinal cells with simple process． 【Key words】 Echinococcus granulosus；Hydatid；Germinal cell；Primary culture 细粒棘球蚴是细粒球绦虫（Echinococcus granulosus, Eg）续绦期幼虫，可寄生于人或多种动物致囊性棘球蚴病(Cystic Echinococcosis)，也称包虫病(Hydatidosis)，是一种呈世界性分布的严重人兽共患慢性寄生虫病[1,2]。2005年中国卫生部人体重要寄生虫病现状调查结果显示包虫病仍然是我国人民群众特别是西部牧区群众的身体健康和生命安全的严重威胁，已被列为我国需要重点防治的寄生虫病之一[3]。 生发层细胞是细粒棘球蚴中具有分裂繁殖力的关键细胞组分，可能后续多向分化发育成原头节、生发囊等棘球蚴组成部分以至发育成完整的细粒棘球蚴全新个体，是寄生虫新生命的起源。体外分离、培育的棘球蚴生发细胞，可作为寄生虫细胞生物学、生物化学及抗虫药物的筛选等研究的体外模型。采用目前国内外报道的常用方法进行棘球蚴生发细胞原代培养，细胞分离困难，体外培养