3、医疗器械的无和初始污染菌检验.ppt

乳糖胆盐培养基中用的是溴甲酚紫作指示剂，该指示剂中性时呈蓝紫色，酸性时呈黄色，大肠杆菌能分解乳糖产酸产气，因此培养基变成黄色和产生气泡。 绿脓杆菌检测方法 样液5mL接种至50mL SCDLP培养液中，充分混匀， 置35 ℃±2 ℃培养(18~24)h，如有绿脓杆菌生长，表面呈现一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。 从培养液菌膜处挑取培养物，划线接种十六烷三甲基溴化铵琼脂平板，置35 ℃±2 ℃培养(18~24)h，观察菌落特征。绿脓杆菌生长良好，其他菌不长。 取疑似菌落作革兰氏染色镜检，为阴性者需进行氧化酶、绿脓菌素、硝酸盐还原产气、明胶液化等一系列试验。 金黄色葡萄球菌检测方法 样液5mL接种至50mL SCDLP培养液中，充分混匀， 置35 ℃±2 ℃培养24h。 如有菌生长，划线接种在血琼脂培养基上，置35 ℃±2 ℃培养(18~24)h，观察菌落特征。 取疑似菌落作革兰氏染色镜检，为阳性呈葡萄状，无芽孢荚膜者，需进行甘露醇发酵、血浆凝固酶等一系列试验。 溶血性链球菌检测方法 样液5mL接种至50mL葡萄糖肉汤中，充分混匀， 置35 ℃±2 ℃培养24h。 如有菌生长，划线接种在血琼脂培养基上，置35 ℃±2 ℃培养18h~24h，观察菌落特征。 取疑似菌落作革兰氏染色镜检，如为阳性呈链状排列的球菌，需进行链激酶杆菌肽敏感等一系列试验。 真菌菌落总数检测方法 若标准对真菌菌落总数有具体数值要求，则测试方法基本同细菌菌落总数检测方法，只是培养基采用沙氏培养基，培养温度为25 ℃±2 ℃培养7天。 若标准要求真菌不得检出，则取样液5mL接种至50mL沙氏培养基中，25 ℃±2 ℃培养7天，逐日观察有无真菌生长；若培养管浑浊应转种沙氏琼脂培养基，证实有真菌生长，可报告被检样品检出真菌。 微生物学检查 无菌检查 微生物限度检查 其他 （初始污染菌） 细菌、真菌数量 控制菌（大肠、金葡、绿脓等） 医疗器械的无菌和初始污染菌检验相关标准 GB/T 14233.2 -2005 医用输液、输血、注射器具检验方法 第2部分：生物学试验方法 2010年版《中国药典》无菌检查法 GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准 GB/T 15980-1995 一次性使用医疗用品卫生标准 YY 0033-2000 无菌医疗器具生产管理规范 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 由于无菌检验时间跨度较长，因此过程的记录应能够完整体现试验的全过程，对于在试验过程中出现的各种情况，均应在记录中客观反映。 直接接种法试验结果 薄膜过滤法试验结果 无菌检查法 判定 试验报告中宜给出下列信息： 供试品名称； 生产批号和（或）灭菌批号； 供试液制备方法； 接种方式； 每日观察结果（包括阴、阳性对照）； 结果判定 试验报告 （1）培养基配制记录 （2）灭菌器、天平等仪器的使用记录 （3）培养基无菌性检查、灵敏度检查记录 （4）菌种购买、传代、使用记录 （5）方法学验证记录 （6）无菌试验记录 （7）灭菌物品制作 （8）废弃物处理记录 （9）洁净间监测记录 医疗器械无菌检验应有记录 一、适用范围 二、检查内容 1.选择的无菌检验方法 2.检验人员 资质 3.现场察看无菌实验室环境 4.设备和器具 5.管理制度、操作规程等相关技术文件 6. 查阅试验记录 三、其它应注意的问题 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） （1）培养基制备 （2）供试品的无菌检查 （3）培养及观察 （4）结果判断 （1）样品记录 （2）灭菌物品制作记录 （3）原始试验记录 （4）废弃物处理记录 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 其它应注意的问题还包括： 生产企业应确保样品具有代表性：试验样品应从常规产品中能够代表加工过程和条件的批中选择。选择样品是随机的。试验样品的选择和处理技术应明确，以免对样品上所含的微生物的数量和种类造成污染和改变。试验样品可以选择制造过程中的不合格产品，它们应该代表这个生产批的加工程序和条件。用于试验的不合格产品应不会影响无菌测试的有效性。 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 其它应注意的问题还包括： 生产企业对于供试品的选取、转移过程要采取防止污染措施，确保试验结果的可靠性。选取制作供试品的试验样品时，样品包装须完好无损，尤其是只有一层包装的样品。进入无菌检验室的样品若有两层（或两层以上）包装的，需将外包装在传递窗（或缓冲间）拆除后，传入实验室。 无菌试验要点 器具灭菌：所有器具高压灭菌121℃30min， 硫乙醇酸盐流体培养基: 接种前, 培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5