色谱-厦门大学化学化工学院.PPT

咖啡因的简介 性质描述 检测方法碘量法HPLC 法近红外光谱分析法毛细管电泳法 碘量法  HPLC 法 ＨＰＬＣ法测定步骤 首先确定色谱条件，包括色谱柱的选择，流动相、流速、检测波长、柱温及进样量Ｓ等。 近红外光谱分析法 基本原理： 采用近红外光谱分析技术对咖啡因进行了光谱及定量分析 , 原始光谱表明咖啡因在近红外波段有着很强且较为明显的吸收峰。通过对样品的漫反射原始吸光度光谱进行导数、散射校正及相关分析更清晰地给出了咖啡因在近红外光谱波段的光谱特性 , 为建立快速稳健的定标模型创造了条件。 近红外法使用仪器 近红外光谱分析法测定 * 厦门大学化学化工学院 分析化学课程 何旭等 内容提要 咖啡因简介 咖啡因的检测方法 ¤碘量法 ¤ HPLC法 ¤近红外光谱分析法 ¤毛细管电泳法 咖啡因（Caffeine ）是从茶叶、咖啡果中提炼出来的一种生物碱，适度地使用有祛除疲劳、兴奋神经的作用，临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。 它的化学式是C8H10N4O2。它的化学名是1,3,7-三甲基黄嘌呤或3,7-二氢-1,3,7三甲基-1H-嘌呤-2,6-二酮。 本品含一分子结晶水，为白色或带极微黄绿色，柔韧有丝光的针状结晶，升华精制得六角形棱柱状晶体。熔点238℃，178℃升华。 极易溶于吡咯及含4%水的四氢呋喃。溶于乙酸乙酯，微溶于石油醚。 基本原理 ： 碘量法是利用I2的氧化性和I-的还原性进行滴定的分析方法 。 测定步骤（间接碘量法）： 咖啡因检测（间接碘量法）： 称取咖啡因，加稀硫酸，滤过 加碘液，稀释，摇匀 量取续滤液，用硫代硫酸钠液滴定 至近终点，加淀粉指示液，继续滴至蓝色消失 将滴定的结果用空白试验校正 ☆ HPLC法 优点： HPLC即高效液相色谱法，是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上发展起来的一种现代色谱分析方法。具有样品适用范围广，分离效率高，检测灵敏度高，分析速度快，样品回收方便并易将分析放大为制备分离等特点。 HPLC法 。 基本原理： 1、就分离原理而言，HPLC与经典柱层析（色谱）没有本质区别，一般是在柱状的固定相（层析柱）上加入待分离的样品，然后用流动相淋洗，根据样品组分与固定相及流动相作用力不同，在通过层析柱的过程中，不同的组分得到了分离。 2、 高效液相色谱法的分类（按照分离机理）： （1）吸附色谱。 （2）分配色谱。 （3）离子交换色谱。（IEC） （4）体积排阻色谱。（SEC） （5）亲和色谱。（AC） HPLC高效液相色谱仪工作原理： （1）高压输液系统。 （2）进样系统。 （3）色谱柱系统。 （4）检测系统。 数据记录仪 高效液相色谱仪 液相色谱紫外检测器 （1）绘制标准 工作曲线 （2）精密度试验与回收率试验 （3）实际样品含量测定 ＨＰＬＣ法测定步骤 ☆ ☆ *