甘蓝型油不菜骨干亲本7-5千粒重的遗传改良.docxVIP

华中农业大学2016届硕士研究生学位(毕业)论文3结果与分析 华中农业大学2016届硕士研究生学位(毕业)论文 3结果与分析 19 3．1 BC2Fl世代群体遗传背景分析与选择 19 3．2 BC3FI世代群体遗传背景分析与选择 20 3．3 BC4F1和BC3F2世代群体的分析与选择 22 3．4 BC4F2和BC3F3世代群体的分析与选择 24 3．4．1 BC4F2和BC3F3世代群体千粒重性状考察 ．24 3．4．2构建Bulk池筛选与千粒重性状连锁的标记 ．25 3．4．3 BC4F3和BC3F4群体的获得 ．28 3．5 BC4F3和BC3F4世代群体前景选择 29 3．6 BC4F4和BC3F5世代的选择 30 3．7 BC4F5和BC3F6世代群体综合评价 30 3．7．1基因组背景分析 30 3．7．2产量相关性状考察 3 l 3．8小孢子培养获得再生苗 一33 4讨论 34 4．1分子标记应用于传统育种 ．34 4．2简化基因组测序的应用 ．34 4．3小孢子培养技术的应用 ．．36 参考文献 37 致谢 45 II 万方数据 甘蓝型油菜骨干亲本7．5千粒重的遗传改良摘要 甘蓝型油菜骨干亲本7．5千粒重的遗传改良 摘要 菜籽油是我国主要的食用植物油之一，提高油菜总产是保障我国食用植物油安 全供应的重要措施，而在当前油菜种植面积持续下滑的形势下，进一步提高单位面 积产量是提高总产最经济有效的措施。油菜单位面积产量主要受单株产量和种植密 度影响，影响油菜单株产量的三个重要因子为千粒重、每角粒数和单株角果数，尽 可能提高并协调这三个产量构成因子是油菜高产育种的主要策略。 本课题组选育的高配合力恢复系7—5已配组审定多个高产优质杂交种，但这些 品种均表现较小的千粒重，多年的育种经验发现，进一步提高恢复系7．5的千粒重 有可能提高其杂种产量。 本研究以ZSlIX(半冬性甘蓝型油菜常规品种中双ll号的自交后代中选育出 一份千粒重较大的选系)为粒重供体亲本，采用传统杂交回交育种、分子标记辅助 选择结合表型选择的策略，对7．5的干粒重进行遗传改良。主要研究结果如下： 1、经过BClFl、BC2F1和BC3Fl三个世代的背景选择，四次回交，四个世代的 千粒重表型选择，最终在BC4F2世代获得籽粒存在大小粒分离的株系群体，其中两 个株系群体符合粒重：粒轻=3：1的分离比。 2、采用混合分离分析法，利用BC4F2世代分离群体的千粒重极端单株，从实 验室已有的SSR标记中筛选到4个与千粒重性状连锁的标记，分别为SSRl313、 SSRl316、SSRl328、SSRl820。这4个SSR标记与白菜基因组数据库进行BLAST 分析，均与A9染色体具有较好的微观共线性，且其中两个标记SSRl313、SSRl316 位于本实验室构建的甘蓝型油菜A9染色体上。因此，我们认为BC4F2世代分离群 体的千粒重受A9染色体上一个主效QTL控制。 3、采用RAD—seq测序技术评价3个BC4F5株系和5个BC3F6株系的遗传背景 恢复率。其中所有BC4F5株系和2个BC3F6株系背景恢复率达80％以上，3个BC3F6 株系背景恢复率为60％以上，且前景选择标记均位于差异区段内。考察这8个株系 的千粒重、每角粒数、籽粒密度、角果长等农艺性状，结合遗传背景分析结果，获 得了4个遗传背景恢复率高，干粒重相对7—5显著提高，每角粒数、籽粒密度、角 果长介于双亲之间的改良系材料。 万方数据 4、通过对BC。F5和BC3F6世代株系进行小孢子培养，最终共获得700个左右的再生苗，为千粒重QTL精细定位提供了潜在可用的近等基因系材料，为千粒重改 4、通过对BC。F5和BC3F6世代株系进行小孢子培养，最终共获得700个左右的 再生苗，为千粒重QTL精细定位提供了潜在可用的近等基因系材料，为千粒重改 良提供优良育种材料。 关键词：甘蓝型油菜；千粒重；遗传改良；小孢子培养 万方数据 —— —— 笪堕型垫薹量王薹查!：!王塑重塑望生堕垦 Abstract Increasing the total production of rapeseed is the main approach to ensure the supply of edible vegetable oil in China，because the rapeseed oil is one of the main edible vegetable oil in China．However,the planting area for rapeseed is shrinking in recent years．So the most effective measure to incr