禾本科植物内生真菌基因组DNA的快速提取.doc

PAGE II PAGE I 分类号 Q93 分类号 Q93 学 号2009116093 硕 士学位论文 我国Epichlo? yangzii内生真菌中NRPS基因的探索和波胺合成基因perA的克隆 王 永 指导教师 王志伟 教授 专业名称 微 生 物 学 研究方向 植物微生物学 答辩日期 二○一二年五月 EXPLORATION OF NRPS GENES AND CLONGING THE PERA GENE IN EPICHLO? YANGZII By WANG YONG A DISSERTATION SUBMITTED TO NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY IN PARTICAL FUFILMENT OF THE REQUIRMENTS FOR THE MASTER DEGREE OF SCIENCES SUPERVISED BY：PROFESSOR WANG ZHIWEI DEPARTMENT OF MICROBIOLOGY COLLEGE NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY NANJING 210095, P. R. CHINA MAY 2012 王永 我国epichloae内生真菌中NRPS基因的探索、分布特征和波胺合成基因的克隆 2012 PAGE 本研究是在国家自然科学基金（批准号NS的支持下完成的。 原 创 性 声 明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者（需亲笔）签名： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。 保密□，在 年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密□。 （请在以上方框内打“√”） 学位论文作者（需亲笔）签名： 年 月 日 导师（需亲笔）签名： 年 月 日 目 录 PAGE 112 PAGE 127 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u 摘 要 I ABSTRACT III 第一部分 文献综述 1 非核糖体肽合成酶（NRPS）：结构、功能、基因及基因的分析方法 1 1. 肽类次生代谢物 1 2. 非核糖体肽合成酶NRPS 3 2.1 NRPS基因结构 5 2.2 NRPS的功能多样性 8 2.3 NRPS基因的特征 10 3. Epichloae内生真菌的NRPS基因及其和生物碱合成的关系 12 3.1 Epichloae内生真菌中的NRPS基因 12 3.2 Epichloae内生真菌中的生物碱 15 3.2.1 麦角类生物碱（ergot alkaloids）的合成 15 3.2.2 吡咯并吡嗪类生物碱 17 3.3 E. festucae E2368中NRPS基因的分布 20 4 如何分析NRPS基因？ 20 5 数据库 22 6 新NRPS基因的研究 23 6.1 如何确定新的NRPS基因 23 6.2 新NRPS基因的生物合成 24 7 本研究的主要内容和意义 24 参考文献： 25 第一章 Epichlo? yangzii内生真菌的检测、分离、培养及鉴定 31 前言: 31 1 材料和方法 33 1.1 植物样品的采集、保存和鉴定 33 1.2内生真菌的镜检 33 1.3 内生真菌的分离、纯化和保藏 33 1.4 内生真菌的培养以及培养物的特征调查 33 2 结果与分析 34 2.1 带子座样品的采集及鉴定 34 2.2 菌株的分离、培养和保藏 34 2.3 菌株的形态学特征 35 3 讨论 37 参考文献： 39 第二章 禾本科植物