新编生物工艺学 教学课件 ppt 作者 俞俊棠 唐孝宣 邬行彦 李友荣 金青萍 编第十章 动物细胞培养.pptxVIP

新编生物工艺学 10 动物细胞培养10 动物细胞培养10 动物细胞培养1细胞培养物的特性2培养基3细胞培养的基本方法4细胞培养用生物反应器5组织工程6实例：杂交瘤细胞培养工艺10.1细胞培养物的特性细胞的贴壁依赖性生长1细胞培养物2细胞的生长和死亡344410.1.1 细胞的贴壁依赖性生长来自于动物实体组织的大多数细胞需要贴壁单层生长。只要它们没有转化为非贴壁依赖性的，必须贴附在合适的固体介质上并铺展，才能开始生长。这种需要贴附到固体介质上才能生存和生长的细胞，称为贴壁依赖性细胞。10.1.2 细胞培养物10.1.2.1 原代培养物10.1.2.2 正常细胞①二倍体的染色体互补表明没有明显的基因改变② 有限的寿命反映了细胞的生长调节③细胞无恶性④贴壁依赖和密度抑制表明其增殖受到控制10.1.2 细胞培养物10.1.2.3 转化细胞①有些细胞在培养中自发转化②化学转化③病毒转化④致瘤因子转化10.1.2.4 肿瘤细胞10.1.3 细胞的生长和死亡10.2 培养基培养基的物理性质1细胞培养基的基本组成2血清3无血清和无蛋白培养基4444营养物的代谢510.2.1 培养基的物理性质10.2.1.1 pH10.2.1.2 缓冲10.2.1.3 渗透压10.2.1.4 温度10.2.1.5 黏度10.2.1.6 表面张力和泡沫10.2.2 细胞培养基的基本组成10.2.2.1 水10.2.2.2 低相对分子质量营养物（1）能源和碳源物质（2）氮源（3）维生素　（4）无机离子（5）脂类和磷脂前体（6）核酸前体10.2.2 细胞培养基的基本组成10.2.2.3 非营养性物质（1）抗生素（2)pＨ缓冲剂（3）酚红　（4）保护剂（5）还原剂　10.2.3 血清10.2.4 无血清和无蛋白培养基10.2.4.1 无血清培养基10.2.4.2 无血清培养基的常用添加成分（1）白蛋白和脂类（2）胰岛素　（3）转铁蛋白（4）乙醇胺　10.2.4 无血清和无蛋白培养基（5）亚硒酸钠　（6）微量元素　（7）生长因子　（8）其他添加物质　10.2.5 营养物的代谢10.2.5.1 葡萄糖的代谢10.2.5.2 谷氨酰胺的代谢10.2.5.3 其他氨基酸的代谢10.2.5.4 代谢流分析10.2.5 营养物的代谢图10-110.2.5 营养物的代谢图10-210.3 细胞培养的基本方法10.3 细胞培养的基本方法动物细胞培养基本工艺1维持培养和放大培养2细胞计数34细胞保存44410.3.1 动物细胞培养基本工艺10.3.2 维持培养和放大培养10.3.2.1 培养容器10.3.2.2 微载体10.3.2.3 贴壁培养10.3.2.4 悬浮培养10.3.3 细胞计数细胞计数可以确定细胞密度和存活率。最常用的染料是台盼蓝10.3.4 细胞保存细胞的冷冻和复苏过程须注意安全问题，防止液氮的伤害。快速解冻是冷冻细胞复苏的关键10.4 细胞培养用生物反应器一台动物细胞培养生物反应器的设计必须考虑如下要求①生物因素②传质因③流体力学因素④传热因素⑤安全因素⑥操作因素10.4 细胞培养用生物反应器动物细胞培养用生物反应器的形式1细胞培养生物反应器的控制系统2生物反应器中的细胞培养模式3410.4.1 动物细胞培养用生物反应器的形式10.4.1.1 气升式生物反应器10.4.1.2 通气搅拌生物反应器10.4.1.3 中空纤维管生物反应器10.4.1.4 无泡搅拌反应器10.4.1.5 流化床和填充床反应器10.4.1 动物细胞培养用生物反应器的形式图10-410.4.2 细胞培养生物反应器的控制系统10.4.3 生物反应器中的细胞培养模式10.4.3.1 分批培养10.4.3.2 流加培养10.4.3.3 半连续培养10.4.3.4 连续培养10.4.3.5 灌注培养10.5 组织工程体外重建人体组织的培养1组织工程的研究进展2410.5.1 体外重建人体组织的培养10.5.1.1 培养方式（1）可生物降解聚合物骨架培养（2）微囊化培养（3）中空纤维反应器培养（5）微载体培养　10.5.1 体外重建人体组织的培养10.5.1.2 细胞分化体外培养组织或器官的关键是如何维持细胞群体的特异分化功能10.5.1.3 细胞特性的检测10.5.2 组织工程的研究进展10.5.2.1 人工皮肤10.5.2.2 造血组织10.5.2.2 人工肝脏10.5.2.2胰组织①用管状膜以卷曲方式包裹胰岛②用中空纤维培养胰岛，把装置植入糖尿病鼠的腹腔内③用微囊化培养胰岛10.6 实例：杂交瘤细胞培养工艺细胞株1培养基制备2细胞的冻存和复苏34方瓶和转瓶分批培养44生物反应器流加培养5生物反应器灌注培养610.6.1 细胞株10.6.2 培养基制备有血清培养基无血清培养基10.6.3 细胞的冻存和