茶园土壤微生物群落结构变化动态的研究.ppt

茶园土壤微生物群落结构变化动态的研究 报告人： 苏远科 指导老师: 刘波 研究员 感谢各位专家提出宝贵意见 农业生物资源研究所 不同月份茶树根际土壤微生物脂肪酸标记总量PLFAs比较 1、2、3分别代表树龄4年8年和15年的茶园土壤，ck没有种植茶树的梯田壁上的土壤，504代表未开发的原始林地土壤。 季节变化对茶园土壤微生物群落影响研究 农业生物资源研究所 图 13不同月份茶树根际土壤细菌磷脂肪酸标记C16:00比较 1、2、3分别代表树龄4年8年和15年的茶园土壤，ck没有种植茶树的梯田壁上的土壤，504代表未开发的原始林地土壤。 季节变化对茶园土壤微生物群落影响研究 农业生物资源研究所 图 14不同月份茶树根际土壤真菌磷脂脂肪酸标记18:1ω9c及18:3ω6c(6,9,12)比较 1、2、3分别代表树龄4年8年和15年的茶园土壤，ck没有种植茶树的梯田壁上的土壤，504代表未开发的原始林地土壤。 季节变化对茶园土壤微生物群落影响研究 * * 农业生物资源研究所 农业生物资源研究所 论文概述 研究意义 研究内容 结论分析 技术路线 农业生物资源研究所 论文概述 磷脂脂肪酸 (phospholipid fatty acid，PLFA)图谱分析，在微生物群落动态分析上的应用十分广泛。磷脂是构成生物细胞膜的主要成分，约占细胞干重的5％。在细胞死亡时，细胞膜很快被降解，磷脂脂肪酸被迅速代谢掉，因此它只在活细胞中存在 ，十分适合于微生物群落的动态监测。另一个重要因素是脂肪酸具有属的特异性，特殊的甲基脂肪酸已经被作为微生物分类的依据。磷脂脂肪酸谱图分析法首先将磷脂脂肪酸部分提取出来，然后用气相色谱分析，得出PLFA谱图。群落的微生物结构发生变化，即可以通过谱图的变化得到快速有效的监测。 本文就是利用PLFA图谱分析研究安溪不同树龄，海拔高度，季节的茶园土壤微生物群落动态变化，从而对安溪茶园土壤微生物群落结构及变化有一定的了解，对茶园生态建设提供理论指导。 农业生物资源研究所 研究意义 安溪乌龙茶全国文明，茶香，茶色，茶味，都有独到之处，形成如此优良的品质和当地自然环境包括地理水文光照土壤等是分布不开的，在这种独特的环境中一定也孕育着独特的土壤微生物群落。茶园土壤微生物群落作为一种指标反映茶园土壤及茶树生长状况。对茶园生态建设有一定的指导意义。 目前在国内还很少人利用磷脂脂肪酸图谱分析对茶园土壤微生物群落进行研究。所以本文应用PLFA分析法对不同树龄，海拔，季节的茶园土壤微生物群落变化动态进行比较系统的研究，有一定理论意义和实用价值。 农业生物资源研究所 研究内容 从安溪感德和西平两地，根据不同季节，不同树龄，不同海拔采集茶园土样。进行土壤磷脂脂肪酸提取及测定。 通过聚类分析主成分分析等统计学方法对磷脂脂肪酸图谱分析来研究茶园土壤微生物群落在不同季节，海拔高度，及不同树龄情况下茶园土壤微生物群落动态变化及差异。 土样采集地点选择 农业生物资源研究所 技术路线 土样采集和保存 土样磷脂脂肪酸提取和测定 测量数据处理和汇总 不同季节茶园土 壤磷脂脂肪酸分析 不同树龄茶园 土壤磷脂脂肪酸分析 不同海拔高度茶园 土壤磷脂脂肪酸分析 农业生物资源研究所 磷脂脂肪酸提取方法及步骤 KOH甲醇溶液和4g的新鲜土样加到50ml的离心试管中，混合均匀 在37℃下温育1h(脂肪酸释放，并甲脂化，样品10min涡悬1次) 加入3ml 1.0mol/L的醋酸溶液中和pH值，充分摇匀。 加10ml正己烷，使磷脂脂肪酸（PLFA）转到有机相中，800r/min离心， 将上层正己烷转到试管中，在N2气流下挥发掉溶剂 用1ml体积比为1:1的正己烷:甲基丁基醚溶液溶解,用作GC分析。 碱裂解与甲脂化 中和 脂肪酸萃取 脂肪酸提取GC分析 农业生物资源研究所 感德槐东村大岭新土 10 800 17 感德仙荣新土 15 500 16 剑斗黄壤土 25 700 15 感得槐杨茶园新土 22 700 14 感德槐杨茶园 22 700 13 剑斗仙荣村新土 22 500 12 剑斗仙荣村 22 500 11 感德槐东村大岭 15 800 10 感德槐东村大岭 8 800 9 感德槐东村大岭 5 800 8 剑斗仙荣村 4 500 7 感得槐东村大岭 3 800 6 感德槐杨茶园新土 3 700 5 感德槐杨茶园 3 700 4 剑斗仙荣村 3 500 3 剑斗后山茶场老茶园改造新土 3 600 2 剑斗后山茶场老茶园改造 3 600 1 备注 茶园树龄（年） 海拔（m） 土样编号 不同海拔高度茶园土壤微生