生物化学A上-5蛋白质理化特性和分离提纯 酶.pptx

蛋白质;蛋白质结构的层次;肽链中的肽平面;蛋白质二级结构的主要形式;α- 螺 旋 的 特 性;氨基酸残基侧链可影响α-螺旋的形成; β-折叠的特点：; β-折叠有平行和反平行的两种形式: ;?-转角（β-turn）;细胞色素C的三级结构;;Up and down βBarrel;β-barrel with Greek key ;β – sheet formed structure;蛋白质的三级结构;蛋白质的一级结构决定其三级结构。换言之，蛋白质的三维立体结构完全取决于其氨基酸的序列。 Anfinsen （1972诺贝尔奖获得者）用实验证明了蛋白质的一级结构决定其高级结构。;蛋白质的四级结构;作用力 破坏因子 氢键：α-螺旋，β-折叠 尿素，盐酸胍 疏水作用：形成球蛋白的核心 去垢剂，有机溶剂 Van der Waals力：稳定紧密堆积的集团和原子 离子键：稳定α-螺旋，三、四级结构 酸、碱 二硫键：稳定三、四级结构 还原剂 配位键：与金属离子的结合 螯合剂 EDTA;蛋白质高级结构的原则-自由能最低;蛋白质结构与功能;蛋白质二级结构与功能的关系;角蛋白keratin的结构特征; Myosin;胶原蛋白Collagen的特殊性;;His F8 (His93);自由的血红素中的二价铁被氧化成为三价铁，不再结合氧气。 肌红蛋白中的组氨酸能够协助维持血红素中铁为二价形式，保证与氧气的结合能力。;Reversible protein-ligand interaction;血红蛋白(Hemoglobin);肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)的氧解离曲线; 协同效应(cooperativity) ;定义：变构效应亦称别构效应，是指一个蛋白质与它的配体结合后，蛋白质的构象发生变化,使它更适合于功能的需要，这一类变化称为别构效应。 别构蛋白（allosteric protein）：是指具有别构效应的蛋白质或酶.如血红蛋白 别构剂： 亦称效应剂,是指凡能触发蛋白质分子发生别构效应的物质。如O2 ; ;34;HbO2;当nH=1，配体结合没有协同性； 当nH1，配体结合正协同； 当nH1，配体结合负协同； 理论上当nH=n，达到最大值，所有位点结合配体，实际中不存在，所以实际测得的nH总是小于n。; 0 20 40 60 80 100 120;BPG降低血红蛋白对O2的亲和力;High attitude Adaptation;胎儿的Hb比成人的Hb对O2的亲和力强 胎儿的Hb比成人的Hb对BPG的亲和力弱;Hemoglobin has lower affinity for O2 than myoglobin Binding of O2 enhances binding of more O2 (cooperative binding). Affinity of hemoglobin for O2 is pH dependent. Binding of H+ and CO2 promote release of bound O2 in muscles. O2 affinity is regulated by organic phosphates. Example: 2,3-bisphosphoglycerate (BPG) lowers affinity for O2. ;蛋白质结构与疾病; 生物体内的每一个基因均受到来自生物演化的选择压，其结果是每个蛋白质均有其独特（和唯一的）的立体的结构，和生化生理功能。; 蛋白质构象疾病：若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时可导致疾病发生。; 蛋白质构象改变导致疾病的机理：有些蛋白质错误折叠后相互聚集，常形成抗蛋白水解酶的淀粉样纤维沉淀，产生毒性而致病，表现为蛋白质淀粉样纤维沉淀的病理改变。 这类疾病包括：人纹状体脊髓变性病、老年痴呆症、亨丁顿舞蹈病、疯牛病等。;PrPc α-螺旋;Prion在病理组织中的纤维状聚合体;重要蛋白质序列的改变可引起疾病; 镰刀状红细胞贫血;常利用蛋白质数据库;蛋白质的理化性质;蛋白质的理化性质;一、蛋白质的两性电离;蛋白质的等电点（pI） ;二、蛋白质的胶体性质;疏水区域;;蛋白质在等电点的溶解度最小;三、蛋白质的变性、沉淀和凝固 ;蛋白质变性后理化性质和物理性质的改变 溶解度降低 粘度增加 结晶能力消失 生物活性丧失 易被蛋白酶水解 应用举例：临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。防止蛋白质变性