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* * Chapter 9 Microbial Growth and Growth control 微生物的生长及其控制 第一节、测定生长繁殖的方法 测生长量 记繁殖数 计繁殖数 a. 用计数板在光学显微镜下直接计数,(包括活菌与死菌) b. 通过染色的方法鉴别出死菌与活菌,然后计活菌数 直接法 间接法 是一种活菌计数的方法,菌落计数法。 1. 平板菌落计数法 The usual practice, which is the most valid statistically, is to count colonies only on plates that have between 30 and 300 colonies. To make a 10-fold (10?1) dilution, one can mix 0.5 ml of sample with 4.5 ml of diluent, or 1.0 ml sample with 9.0 ml diluent. 涂布平板 浇注平板 为了快速检测出 结果,一般在培养基中加入指示剂TTC。 第二节 微生物的生长规律 微生物的个体生长和同步生长 细胞在不同时期发生阶段性的生物化学变化和细胞学变化 -------希望把某一群体中所有的细胞尽可能都处于同样细胞 生长和分裂周期中,分析群体在各阶段的生物化学变化, 来间接了解单细胞的相应的变化规律。 同步生长:通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态。 Eukaryotic cell: Prokaryotic cell: G1 S G2 M G1 R D 获得微生物同步生长的方法 环境条件诱导法: 机械筛选法 Growth curve of bacteria Lag Phase Exponential Phase Stationary Phase Death Phase Lag Phase 是细胞的适应时期,细胞数目没有改变 特点: 1. 生长速率常数为零 2. 细胞形态变大或增长 3. 细胞内的RNA尤其是rRNA含量增高,原生质嗜碱性 4. 合成代谢十分的活跃,易产生各种诱导酶 5. 对外界不良条件反应敏感 Exponential Phase(指数期) 是在生长曲线中,紧接着延滞期的一段细胞数以几何 级数增长的时期。 特点: 生长速率的常数最大,倍增时间最短 细胞进行平衡生长,菌体各部分的成分十分均匀 酶系活跃,代谢旺盛 Stationary Phase 特点:生长速率常数为0 新繁殖的细胞和衰亡的细胞数相等,处在动态平衡当中。 恒定期:最高生长期 稳定期到来的原因 营养物尤其是生长因子的耗尽 营养物的比例失调。 有害代谢产物的积累 物理化学条件越来越不适宜等等、 Death Phase 微生物个体死亡速度超过新生的速度,成负生长状态。 产生衰亡期的原因 外界环境对生长越来越不利,引起细胞内的分解代谢明显超过合成代谢,导致大量菌种的死亡 第三节 影响微生物生长的主要因素 Three main factors : Temperature pH oxygen Effect of temperature on bacterial growth rate Bacteria grow over a range of temperatures; they do not reproduce below the minimum growth temperattire nor above the maximum growth temperature. Within the temperature growth range there is an optimum growth temperature at which bacterial reproduction is fastest.(p161) Microorganisms are classified as psychrophiles, mesophiles.thermophiles, and extremethemophiles based on their optimal growth temperature. Effect of oxygen concentration on the growth of various bacteri
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