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材料与设备 欢迎各位老师和同学批评指正！ 谢谢！ 山楂红色素的微波辅助提取及其抗氧化性的研究 汇报人：程海霞 指导教师：闫丽萍 二0一二年六月九日 研究背景 山楂红色素是一种天然色素，含有可溶性糖、酸和黄酮类物质，属于天然花青素类色素。具有抗氧化和消除自由基作用，有一定药用和保健价值。---------有应用前景 山楂红色素的传统提取方法主要有常温提取和索氏提取。但传统方法通常有耗时长、性质不稳定且易污染等缺点。 微波萃取是利用微波能来提高萃取率的一种新技术，其原理是在微波场中，吸收微波能力的差异使得基体物质的某些区域或萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使得被萃取物质从基体或体系中分离。 与传统提取方法相比，微波萃取有快速、节能、节省溶剂、污染小，而且能有效避免萃取出的热不稳定物质在高温条件下分解，特别适合于处理热敏性组分或从天然物质中提取有效成分的优点。 本研究采用微波辅助法提取山楂红色素，并测定其对羟自由基的清除情况。 2. 本研究结果能为山楂红色素性质研究和开发利用提供依据。 研究意义 1. 研究和优化出一种具有高效、快速等多种优点的山楂色素提取方法。 研究内容 材料与设备 测 定 方 法 结果与讨论 结 论 1、材料 新鲜山楂果,盐酸、NaOH、邻苯二甲酸氢钾、95%乙醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯、氯仿等均为分析纯，FeSO4和H2O2等。 2、仪器设备 旋转蒸发仪、722分光光度计、恒温水浴锅、电子天平等。 色素提取分两个阶段，一是选料、清洗、破碎；二是采用微波辅助提取，对预处理过的山楂皮浸提色素。 具体提取工艺流程为： 鲜果→选料→清洗→削皮→切碎→微波处理→常温浸提→过滤→浸提液 测定方法 1、提取剂的选择 准确称取6份5g新鲜山楂样品（削皮切碎成约3mm× 3mm大小），分别置于6个100ml锥形瓶中，然后分别加入100ml蒸馏水、氯仿、乙酸乙酯、95%乙醇、乙醚和丙酮，置于常温下浸提24h后过滤，分别吸取2ml各浸提液在533nm处测吸光度。每处理组设3个平行样。 2、 pH值的确定 取5份100ml上述最佳浸提溶剂，用0.1%盐酸和0.1%NaOH调节pH分别为2.8、4.0、6.6、8.5和10.0，然后分别加入5g切碎的山楂皮进行浸提，24h后再对各浸提液在533nm处测吸光度。每处理组设3个平行样。 3 、 萃取时间的确定 取5份100ml最佳浸提溶剂，调节pH至最佳，然后分别加入5g切碎的山楂皮，分别浸提2h、4h、8h、24h和48h，测各浸提液在533nm处的吸光度。每处理组设3个平行样。 4、 微波辅助提取山楂红色素 (1) 微波处理时间的确定 称取5份5g切碎的山楂皮分别置于5个100ml锥形瓶中，分别向各锥形瓶中加入10ml 95%乙醇溶液，然后将各锥形瓶分别置于微波炉中处理0、1、2、3和5min后置于常温下，冷却后各加入100ml 95%乙醇溶液，调节pH至最佳，浸提2h后，过滤，取滤液，在533nm处测吸光度。每处理组设3个平行样。 (2) 微波辅助提取时间的确定 根据上述实验得出最佳微波处理时间，然后采用1.2.4.1方法对5份5g切碎的山楂皮进行微波处理，再将其置于常温下分别浸提1h、2h、5h、8h和12h，在533nm处测吸光度。每处理组设3个平行样。 5 、羟自由基(·OH)清除能力的测定 采用H2O2/Fe体系，通过Fenton反应进行测定。向样品管中加入0.75mmol/L FeSO4溶液2mL和浸提溶液1mL，混合均匀后，加入1.0mLH2O2(0.01%)启动反应。 样品管： FeSO4 2ml + 浸提溶液 1ml + H2O2 1ml 未损伤管：FeSO4 2ml + 浸提溶液 1ml 损伤管： FeSO4 2ml + H2O2 1ml 各混合液于37℃恒温反应1h后在533nm处测定各反应液的吸光度。每处理组设3个平行样。 羟自由基清除率的计算公式： 清除率(%)= ×100% 结果与讨论 不同溶剂的浸提效果 0 0 0.440 0 0 0.113 吸光度 丙酮 乙醚 95%乙醇 乙酸 乙酯 氯仿 蒸馏水 溶剂 山楂红色素不溶于乙醚、氯仿、乙酸乙酯和丙酮，而溶于蒸馏水和95%乙醇，且在95%乙醇中的浸提效果约是蒸馏水中的4倍。 这可能是由于山楂红色素是水溶性，但其色素成分主要还是有机物，而提取剂乙醇是有机溶剂，根据相似相溶原理，山楂红色素易于溶于95%乙醇。 因此，本实验研究选用95%乙醇作为提取剂。