caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制.docVIP

PAGE PAGE 6 Caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制 李正杨，周政*，刘俊，赖挺，安家印，雷雪（400037重庆,第三军医大学新桥医院神经外科） [摘要] 目的 观察Caveolae对血管平滑肌细胞增殖的影响及可能机制。方法 取培养第3代VSMC培养皿中培养。干扰组细胞加甲基-β-环糊精(methyl2β2cyclodextrin,MβCD) (5 mmol/L，DMEM配置)作用2h；对照组加入与MβCD等量的DMEM作用2h后以DMEM冲洗3次后正常培养48h。采集细胞进行RT- PCR 检测caveolin-1、pSmad2 mRNA 表达变化，Western Blot法检测caveolin-1、pSmad2 蛋白表达变化，免疫组化检测caveolin-1、TGF-β受体1（TGF-βR1）在细胞中的表达分布,cck-8法检测细胞增殖能力。结果 RT-PCR检测结果显示，caveolin-1在MβC D干扰后，基因和蛋白表达水平明显下降，并且以细胞膜和细胞浆中均高表达为主（P0.01）。而Smad2在MβC D干扰后，基因和蛋白表达水平明显上升。与正常对照组相比，差异有统计学意义（P0.01）。并且TGF-βR1在细胞干扰后主要以细胞核表达增强为主。结论 破坏Caveolae结构可以增强TGF-β/Smad信号通路，抑制Smad2磷酸化和