煤基活性炭固定化酶催化制备纯手性仲醇本科毕业论文.pptVIP

第二页 指导老师：房俊卓 报告人：王 璐 学院：化学化工学院 班级：08级材料班 提 纲 一、前 言 二、实验部分 三、结果与讨论 四、结 论 一、前 言 寻找合适的固定化酶载体，获得优良的固定化酶催化制备纯手性仲醇。 脂肪酶由于其优良的化学、几何、立体选择性以及温和的反应条件，已经广泛应用于酶法拆分外消旋化合物以获得光学纯手性物质。但应用游离酶酶不易回收重复使用及产物很难分离纯化，而采用酶固定化技术则可以克服以上不足。 手性仲醇是精细化学品合成的重要手性中间体，其光学纯对映体的制备是手性化合物合成中的关键步骤。随着人们对手性作用认识的不断深入，对具有光学活性手性物质的需求越来越大，对其纯度的要求也越来越高。广阔的应用前景和巨大的市场需求推动了探索新的更有效的获得手性物质方法的研究。 二、实验部分 活性炭 假单胞菌脂肪酶(PSL) 1-苯乙醇（97% ） 乙酸乙烯酯 异辛烷 正庚烷 2、主要仪器 气相色谱仪（GC-2010),浙江温岭福立仪器分析有限公司; 水浴振荡器（H2S-H）,哈尔滨市东明医疗仪器厂； 电子天平（BS210S），北京赛多利斯天平有限公司； 真空干燥箱（ZKF030），上海实验仪器厂有限公司； 扫描电子显微镜（JSM7500F），日本电子有限公司。 0.1 g活性炭载体分散在10 mL异辛烷中，加入100 L 0.1 mol/L pH 6.5的磷酸缓冲液（PBS），搅拌均匀后静置一段时间，10 mg假单胞菌脂肪酶（PSL）加入到上述混合液中，于30 ℃恒温水浴摇床振荡2小时。振荡完毕后用砂心漏斗抽滤，滤液回收，所得固体置于真空干燥箱中在室温下干燥后冷冻储藏，即得到固定化酶。 固定化酶催化拆分1-苯乙醇的反应式： 反应完毕后，滤液由装有手性毛细管柱气相色谱仪测定。 色谱测试条件为：汽化室温度250℃，柱温108℃，检测器温度250℃，氮载气流速1.9 mL/min，分流比30:1，柱前压0.1 MPa，氢火焰检测器(FID)。 在此条件下，反应体系标准色谱图： 1-(S)-乙酸苯乙酯；2-(R)-乙酸苯乙酯；3-(R)-1-苯乙醇； 4-(S)-1-苯乙醇 三、结果与讨论 1、活性炭孔结构表征 2、活性炭SEM表征 3、不同载体固定化酶催化性能（36h） 4、催化剂催化效果随时间的变化 5、微孔活性炭001-120载体的时间进程曲线 四、结 论 煤基活性炭固定化酶活性大小顺序如下： PSL/微孔活性炭 PSL/中孔活性炭 PSL/煤基活性炭 PSL/吸附剂 PSL/竹炭，孔道的大小对脂肪酶的催化活性有着明显的影响。说明了对于纯的加以修饰的的活性炭，孔径对酶催化活性有着重要的影响，孔径适中，相应的酶活性越高。 致 谢 本论文是在薛屏老师和房俊卓老师的悉心指导下完成，从论文选题、实验方案的制定、实验的安排到论文的撰写、修改，每一步都倾注了导师的大量的心血和汗水。 此外，在实验过程中，得到了张立根学长的许多指导和帮助，感谢他为此付出了大量的精力和宝贵的时间，同时还得到了同我一起做实验的同学们的帮助和支持，在此谨向他们表示衷心的感谢。 煤基活性炭固定化酶催 化制备光学纯手性仲醇 1、目 的 2、意义 1、主要试剂 3、固定化酶制备 取1.0 mmol (R,S)-1-苯乙醇于10 mL正庚烷中，分别加入2.0 mmol 乙酸乙烯酯和100 mg 固定化酶，此混合物置于摇床中，于40℃、160 rpm振荡反应，间隔一定时间取样（每次取100 μL）。 4、拆分1-苯乙醇体系 1#活性炭（001-120） 2#活性炭（001-066） 3#活性炭（001-118） 4#活性炭（000-227） 1#活性炭（001-120） 2#活性炭（001-066） 3#活性炭（001-118） 4#活性炭（000-227） 1.1653 20.38569 92.78093 23.75708 竹炭000-227 280.6425 50.10204 97.25753 97.6553 中孔活性炭001-066 6.91779 37.91313 96.05045 58.65288 中孔活性炭（吸附剂）000-209 14.19784 58.16919 70.49585 98.03028 煤基活性炭001-121 4482.456 49.38218 97.39673 95.01916 煤基活性炭001-118 242.5166 50.27701 97.20178