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植物组织水势的测定(小液流法) (一)目的与要求 1、理解测定植物组织水势的意义 2、了解测定植物组织水势的方法 3、掌握小液流法测定植物组织水势的原理及方法 4、学会露点水势仪测定植物水势的方法。 (二)意义 水势表示水分的化学势,是推动水在生物体内移动的势能。 水势通常用来形容单位体积内水分子的数量高低, 与通常所说的溶液的浓度刚好相反,浓度高的溶液的水势低,浓度低的溶液的水势高。纯水的水势最高,并人为的设定为0。 植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。水的流动方向由水势高的地方流向水势低的地方。 植物组织的水势愈低,则吸水能力愈强,植物组织吸水能力的大小,在一定程度上能反映出植物对水分的要求状况。一般来说,水势低是植物需水的反映。因此,在农业生产中可利用水势的变化作为作物灌溉的参考。 (三)测定方法 液相平衡法:小液流法、折射仪法、电导仪法、 组织体积(重量)法 压力平衡法:压力室法、压力探针法 气相平衡法:露点法 (四)原理--小液流法 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换: ★ ψ植物 ψS:植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水,外液浓度变大; ★ ψ植物= ψS: 若两者相等,则水分交换保持动态平衡,外液浓度保持不变; ★ ψ植物 ψS:植物组织的水势高于外液的渗透势(溶质势),组织失水,外液浓度变小。 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样,浓度大的比重大,把高浓度的溶液的小液滴放到低浓度溶液中时,液滴下沉;反之则上升。 3、当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时,则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的,可以根据公式算出其渗透压,取其负值,为溶液的渗透势(ψs),即代表植物的水势(ψw)。 Ψw= Ψs=-iCRT ②ψ植物= ψS ③ψ植物 ψS 溶液浓度不变,比重不变 溶液浓度变低,比重减小 植物组织失水 等渗溶液 水分交换平衡 ①ψ植物 ψS 溶液浓度变高,比重增加 植物组织吸水 滴回同一浓度而未浸过材料的溶液中 (五)实验材料 灰莉叶片 (六)实验用具与试剂 用具 打孔器1把、镊子1把、试管架、接种针、弯头滴 管1支、15×150试管6支、橡胶塞、青霉素小瓶6个、移液枪1ml、5ml各1把。 试剂 1 mol/kg 蔗糖溶液 甲烯蓝粉末 (七)实验步骤 1. 配制不同浓度的蔗糖溶液:(溶液要摇匀) 2.用打孔器在灰莉叶片的不同部位打90片,混匀,每个青霉素瓶各放入15片,并按顺序编号。(①避开叶脉和伤口;②打孔要迅速) 3.从配制好的试管中各取2ml到相应的青霉素瓶中。放置20—30min,期间震荡数次,以加速水分平衡。(①用移液枪由低至高吸取,枪头不用润洗; ②叶片应完全浸没在溶液里; ③震荡要轻柔) 试管 1 2 3 4 5 6 1mol/kg 蔗糖溶液(ml) 0.5 1 2 3 4 5 蒸馏水(ml) 9.5 9 8 7 6 5 浓度(mol/kg) 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 4. 染色:用接种针沾入微量甲烯蓝粉末加入青霉素瓶中,摇匀,溶液变蓝。( ①用接种针沾甲烯蓝粉末,用手指轻轻的拍手背让其掉入;②加入的甲烯蓝量一定要少,少量多次使各瓶中颜色基本一致) 5.观察液滴升降: 用弯头滴管取青霉素瓶蓝色溶液 插入相应试管中部 缓慢从弯头滴管尖端横向挤出一滴蓝色溶液 观察蓝色液滴的移动方向并记录。( ①滴管需润洗; ②液滴要轻挤;③用白纸划一直线置于试管背面,方便观察) 6.分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。 静止不动 液滴 植物材料 溶液浓度变小 ψw ψS 溶液浓度变大 ψw ψS 溶液浓度不变 ψw =ψS (八)公式与计算 溶液渗透势: ψS = -iCRT = -1 ×C×0.008314×(273 ℃ + t℃) = -? ( MPa ) ψS — 溶液的渗透势,以MPa为单位; i — 溶液的等渗系数,蔗糖=1 ; C — 溶液的摩尔浓度,以mol·kg-1 为单位; R — 气体常数,0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1 ; T — 绝对温度,即273+t℃。 溶液浓度(mol/kg) 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 液滴移动方向 具有平衡浓度结果 溶液浓度(mol/kg) 0.05 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 液滴移动方向 无平衡浓度结果 溶液浓度(mol/kg) 0.
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