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戊型肝炎病毒研究进展 中国药品生物制品检定所 张华远 1983年发现戊型肝炎病毒，近年研究表明，戊型肝炎不仅在亚﹑非国家﹑地区流行，发达国家美国﹑欧洲意大利﹑希腊也存在本土戊型肝炎． 我国戊型肝炎发病率呈上升趋势，因此应正确认识防治戊肝的重要性，加强戊型肝炎研究． 各株戊肝病毒基因结构的比较 HEV分类仍未确定 流行病学： 主要经粪-口途径传播(污染饮用水) 大爆发、散发多见于发展中国家和地区 感染发病主要以青壮年为主 孕妇患戊型肝炎病死率高达± 20％ 病人感染后抗体持续时间 免疫猕猴的抗体反应 抗HEV IgG持续时间 戊型肝炎的临床特征 潜伏期2-10周 临床表现多样，包括： 急性黄疸型 急性无黄疸型 重型肝炎（急性） 无症状的隐性感染 临床表现与其他病毒性肝炎似难区别（孕期感染的妇女除外） 儿童感染发病轻微 病死率低：0.07-0.6％，１～３％ 孕妇感染病死率高：15-25％ 急性肝炎，不引起慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌。 HEV基因分型 中国部分地区戊肝病毒基因型的分布 不同基因型及亚型之间核苷酸序列同源性比较 HEV血清型：目前认为仅一个血清型 依据：举例 1.用不同基因型HEV：Sar-55（人源）I型、 Meng（猪源）III型衣壳蛋白制备的ELISA试剂，检测不同HEV基因型感染猩猩和猴的抗体反应。 2.以上试剂用于检测人、猪血清。 Ⅰ、 Ⅲ 型HEV病毒ORF2抗原EIA检测人血清中的anti-HEV 动物在戊型肝炎流行中的可能作用： 1990年，Balayan发表了用人HEV实验室感染猪的报道。 1996年，WRAIR Clayson 发表过鸡、牛、山羊、水牛、猪中检测抗－HEV的报道。 1997年，Meng测定猪HEV序列，支持了早年的研究。 动物中HEV感染 猪：尼泊尔（33％)、中国（大陆、台湾）泰国、越南(36%)、 美国、加拿大 、韩国、 西班牙、 澳大利亚。 啮齿动物：美国 、越南（9％） 鸡：越南（44％）、 美国 狗：越南（27％） 牛：索马里 塔吉克斯坦 （29～62％） 土库曼斯曼 羊山羊：土库曼斯坦（42~67%） 猪血清样品中戊肝病毒抗体和核酸检测 不同年龄的猪中anti-HEV IgG检测（美国） 牛抗HEV的检测 羊血清抗HEV的检测 人源HEV病毒US-2(III型)感染猪 猪HEV感染恒河猴M305,H400 戊肝病毒Ⅳ型感染猴子的研究 病毒样品：急性戊型肝炎病人的粪便，戊肝病毒4型，HEV RNA滴度为105 粪便悬液：将以上样品制成10％的悬液 猕猴：选3只猕猴，接种前观察1个月，并检查戊肝病毒指标 接种：1只作为阴性对照，1只接种1ml，1只接种2ml。 接种后收集系列血清和粪便样品。 猴子接种2ml悬液后的血清学反应 禽(avian)HEV，获自美国患hepatitis－splenomegaly 鸡 直径30-35nm，无胞膜病毒颗粒 序列位置 同源性 ORF1: helicase gene* ： 58-61％aa，57-60％nt RdRp gene **： 47-50％aa，52-53％nt ORF2 gene 48-49％aa，48-51％nt 家畜、 啮齿类、 禽中存在HEV 感染 猪HEV（III型）可实验室感染猴 人HEV（III型）可实验室感染猪 突破种间屏障 人HEV（I 、 II 、 Ⅳ型）可实验室感染猴 人源、猪源HEV I 、 II 、 III 、 Ⅳ型具有共同抗原性 支持动物可能为部分型别HEV宿主之假说。 疫苗开发的必备条件 1.广泛的流行病学调查基础 2.具备评价疫苗效果的手段 动物模型 评价体液免疫或细胞免疫的方法，试剂 3.具有制造疫苗的主成分，病毒或具有诱发保护性抗体的亚单位抗原。 4.具有经全面检定，已知感染性滴度的病毒，用于保护性试验。 5.保护机制明了：中和表位 被动免疫 噬菌体展示分析HEV的中和表位 放射免疫沉淀反应表明：HEV#4、 HEV#31两者的识别位点为:AA578-607