三角叶黄连内生真菌1621菌株地鉴定与其代谢产物研究.pdfVIP

成都中医药大学2009级硕士研究生论文 图33化合物Ⅵ的结构式(1)和化合物Ⅵ的H—H 图34抑菌试验结果……………………………………………………………………………………46 图35ITS测序图………………………………………………………………………………………50 图36化合物V的IR图谱……………………………………………………………………………5l 图37化合物V的H．HCOSY图谱…………………………………………………………………．51 图38化合物V的HSQC图谱………………………………………………………………………．．52 图39化合物V的HMBC图谱………………………………………………………-．．．……………．．52 图40化合物Ⅵ的m图谱……………………………………………………………………………53 图41化合物Ⅵ的H．HCOSY图谱…………………………………………………………………．53 图42化合物Ⅵ的HSQC图谱………………………………………………………………………一54 图43化合物Ⅵ的HMBC图谱………………………………………………………………………一54 成都中医药大学2009级硕士研究生论文 摘 要 植物内生菌普遍存在于各种植物中，许多内生菌能产生与宿主植物相同或相 似的代谢产物，，且许多是未发现过的新物质。因此利用内生菌筛选生物活性成分 或先导化合物成为寻找天然药物的又一条重要途径，也是植物内生菌目前研究的 热点。在课题组前期对雅连内生真菌进行了分离和抑菌活性部位筛选的基础上， 本文选取了其中一株具有较强抑菌活性的内生真菌1621菌株进行鉴定和发酵产物 的研究。 采用形态学鉴定和分子生物学鉴定相结合的手段，确认菌株1621为曲霉属烟 曲霉的一个新菌株，命名CDl621。通过对菌株CDl621的发酵条件的研究，绘制 了其生长益线和发酵液pH值变化曲线，确定了菌株CDl621生长所需的最佳C／N 比为15：1；通过对碳源、氮源、初始pH值的正交实验筛选，明确影响的大小依 次为：碳源氮源初始pH值：筛选出的最佳培养基组成为：可溶性淀粉(3％)， 硫酸铵(O．2％)，初始pH值为6。 采用大孔树脂、硅胶柱层析和制各液相等分离纯化技术对菌株CDl621发酵液 的乙酸乙酯萃取部位分离纯化，得到6个单体化合物，通过核磁、质谱和红外等 波谱学方法进行分析鉴定，确定6个化合物分别为苯甲酸(I)、软脂酸(II)、 其中化合物Ⅵ为新化合物，首次从自然界中分离得到；还对化合物V的核磁、红 外和旋光数据进行了最新测定，完善了化合物V的结构信息。 以大肠杆菌和金黄色葡萄球为指示菌，采用平板滤纸法对所分离化合物进行 金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用，PseurotinA对大肠杆菌有一定的抑制作用， 化合物V对金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用。 综上所述，从形态学鉴定和分子生物学两方面，完成了对雅连内生真菌菌株 1621的鉴定，发酵条件和培养基的优化，以及其代谢产物进行了分离鉴定和活性 筛选，获得了一个具有抑菌活性的新化合物，为菌株1621的深入研究奠定了基础。 关键词：雅连；内生真菌；ITS；发酵优化；成分研究 成都中医药大学2009级硕士研究生论文 Abstract in ofwhich could found produce Endophytecommonlyplants，manyendophyte ofthemarethenewsubstancenever thesameandsimilarmetabolites，and many the toselectbioactive or is found．So，usingendophytic componentsleadingcompounds an