比色法和分光光度法.pptVIP

学习要求 了解比色法、分光光度法的特点。 掌握光的吸收定律及其适用范围。 掌握分光光度法的分析方法。 了解显色反应及其条件的选择。 了解分光光度法仪器测量的误差及测量条件的选择。 了解分光光度法的某些应用。 化学分析法 酸碱滴定法 配位滴定法 氧化还原滴定法 沉淀滴定法 15.1 概述 二、物质对光的选择性吸收 电磁辐射按波长顺序排列，称电磁波谱。 光学光谱区(Spectral region) ③、 朗伯-比尔定律 二、 分光光度计(spectrophotometer) 分光光度计内部光的传播途径 1. 光源(Light source)：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度,稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320 ～ 2500 nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180 ～ 375 nm) 2. 单色器(monochromator)：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 棱镜 光栅 玻璃350 ～ 3200 nm, 石英185 ～ 4000 nm 3.吸收池(cell):用于盛待测液及参比溶液。 玻璃 — 能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英 — 不吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 5.读数指示器 M + R = MR (被测组分) (显色剂) (有色化合物) R过量，反应完全，MR稳定，A值稳定。 （cM、 cR一定） 3、显色时温度和时间 15.6 分光光度法的某些应用 1).钼蓝法测磷 土壤营养诊断测磷 肥料、谷物种子、果品中磷的测定 血清中磷的测定 水体中磷的测定 PO43-+12MoO42-+27H+ =H7 [P(Mo2O7) 6]+12H2O 二、 多组分的测定 四、酸碱解离常数的测定 五、 配合物组成的测定 1:1 4. 检测器(detector)： 利用光电效应，将光能转成电流讯号。 光电池，光电管，光电倍增管 把光电流放大的信号以适当方式显示或记录下来。通常使用悬镜式光电反射检流计测定产生的光电流。检流计光点偏转刻度直接标为吸光度和透光度，测定时一般可直接读出吸光度。 5.4 显色反应与显色条件的选择 显色反应在分光光度分析中，利用显色反应把待测组分M 转变为有色化合物MR，然后再进行测定。 使试样中的被测组分与化学试剂作用生成有色化合物的反应叫显色反应。所用试剂称显色剂。 M(待测物)＋nR(显色剂)＝MRn(有色化合物) 显色反应主要有配位反应和氧化还原反应，其中绝大多数是配位反应。 一、 对显色反应的要求 1、灵敏度高 选择κ较大的显色反应（一般要为104 ~ 105）。避免共存组分干扰。 2、选择性好 显色剂只与被测组分反应。 3、有色物组成固定 Fe3+ + 磺基水杨酸 → 三磺基水杨酸铁(黄色) （组成固定） Fe3+ + SCN - → FeSCN2+、 Fe(SCN)2 + …… （组成不固定） 4、有色物稳定性高，其它离子干扰才小。如三磺基水杨酸铁的Kf =1042 , F- 、H3PO4 对它无干扰。 5、显色过程易于控制，而且有色化合物与显色剂之间的颜色差别应尽可能大。 二、显色反应条件的选择（实验确定） 1、显色剂的用量 ，适当过量 cR cR cR 适宜的用量通过实验求得(cM、pH一定) 吸光度A与显色剂用量cR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。 （1）对金属离子的影响 （2）对显色剂浓度的影响 （3）影响配合物组成 （4）配合物的稳定性的影响 （5）影响显色剂的颜色 2. 酸度 M + L = ML pH1pHpH2 pH T1(℃) T2(℃) t(min) A 4、溶剂的影响，有机溶剂会降低有色物的离解度，从而提高 显色反应的灵敏度。 ① 影响主要表现 干扰离子本身有颜色。 与试剂生成有色配合物。 与试剂形成无色配合物而消耗显色剂 与被测离子生成离解度小的化合物。 5、干扰物质的影响及消除 (3) 改变干扰离子价态，测Ni2+时，Fe2+ 有干扰，加入氧化剂， Fe2+ → Fe3+ . (4) 分离干扰离子，用萃