郜刚分子生物学-04-DNA复制修复与转座子.ppt

2.5 DNA的修复（自学为主） DNA修复系统 功能 错配修复 恢复错配 碱基切除修复 切除突变的碱基 核甘酸切除修复 重组修复 修复被破坏的DNA 复制后利用重组酶修复 DNA直接修复 修复嘧啶二体或甲基化DNA 1、错配修复 ●Dam甲基化酶使母链位于5’GATC序列中腺甘酸甲基化 ●甲基化紧随在DNA复制之后进行 ●根据复制叉上DNA甲基化程度（母链高，子链低），切除尚未甲基化的子链上的错配碱基 根据母链甲基化原则找出错配碱基的示意图 发现错配碱基 在水解ATP的作用下，MutS，MutL与碱基错配点的DNA双链结合 MutS-MutL在DNA双链上移动，发现甲基化DNA后由内切酶MutH切开非甲基化的子链 注意在什么地方切？怎么切？ 找 错 修 复 甲基化指导的错配修复示意图 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 CH3 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ MutS-MutH-MutL内切酶系 识别甲基化位点 做两种切割 ATP功能 Dam甲基化酶使母链位于5’GATC序列中腺甘酸甲基化，作为错配修复的识别序列 DNA helicaseII Exonuclease VII DNA helicaseII Exonuclease I DNA polymorase III SSB DNA polymorase III SSB 2、碱基切除修复 一些碱基在自发或诱变下会发生脱酰胺，然后改变配对性质，造成氨基转换突变 腺嘌呤变为次黄嘌呤与胞嘧啶配对 鸟嘌呤变为黄嘌呤与胞嘧啶配对 胞嘧啶变为尿嘧啶与腺嘌呤配对 胞嘧啶去氨基生成尿嘧啶 如果复制发生就会产生一个突变 .糖甘水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-β-糖苷键处切下来，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。 由AP磷酸内切酶将受损核甘酸的糖甘-磷酸键切开 。 DNA连接酶连接 利用DNA聚合酶I切除损伤部位，补上核苷酸 3、核苷酸切除修复 1）通过特异的核酸内切酶识别损伤部位 2）由酶的复合物在损伤的两边切除几个核苷酸 3） DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 4）DNA连接酶将切口补平 识别损伤部位 损伤的两边切除几个核苷酸 DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 DNA连接酶将切口补平 特异的核酸内切酶 4 、DNA的直接修复 在DNA光解酶的作用下将环丁烷胸腺嘧啶二体和6-4光化物还原成为单体 甲基转移酶使O6-甲基鸟嘌呤脱甲基生成鸟嘌呤，防止G-T配对 上海生化所1998年分子遗传学试题： DNA修复系统的作用是保证DNA序列不发生任何变化（） 2.6 DNA的转座 （一）基本概念： DNA的转座：由可移位因子介导的遗传物质重排现象。 转座子（transposon）：存在于染色体DNA上可自主复制和位移的基本单位。 转座子的类型和结构特征 （二）转座子的类型和结构特征 原核生物转座子的类型： 1、插入序列(insertional sequence,IS) 2、复合转座子(composite transposon) 3、TnA家族 1、插入序列(IS) IS是最简单的转座子，不含有任何宿主基因，它们是细菌染色体或质粒DNA的正常组成部分。 λ：：IS1 复合转座子是一类带有某些抗药性基因（或其他宿主基因）的转座子，其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列 2、复合转座子(composite transposon) (三）转座作用的机制 复制性转座子 非复制性转座子 上海生化所1998年分子遗传学试题： 转座过程通常是指DNA中的一段特殊序列（转座元）在转座酶以及其它蛋白因子的作用下，从DNA分子中的一个位置被搬移到另一位置或另一DNA分子中（ ） Tn10转座到一个新的DNA靶点时，在靶点两 侧形成倒转重复序列。 (-) 2002年上海生化与细胞所 华中科技大学2004年生物化学与分子生物学硕士研究生入学试题 利用自己的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一个地方的遗传元件叫（ ） A、启动子 B、转座子 C、T-DNA D、顺反子 中国科学院遗传与发育生物学研究所1996年硕士研究生分子遗传学入学试题 转座子（transposon） 反转录转座子（retrotransposon） 反转录转座子（retrotransposon）：指通过RNA为中介，反转录成DNA后进行转座的可动元件。 反转录病毒整合入宿主DNA中