基因诊断的基本原理与临床意义.pptVIP

* * Southern印迹杂交是经典的DNA分析方法。将DNA经限制性酶切及变性后，转移至膜上与标记探针进行杂交。主要用于基因组DNA的分析--检测特异的DNA片段并进行定位和测定相对分子质量；也可有用于基因的酶切图谱分析、基因突变分析等； * * PCR又称为基因扩增技术，通过采用特异性引物扩增特异DNA片段，具有周期短、特异性强、灵敏度高、操作简便、快速以及对原始DNA样品的数量和质量要求低等特点，极大地推动了基因诊断的发展，在基因诊断中已得到了广泛应用。 * * 特异性强 灵敏度高 操作简单、省时 对待检原始材料质量要求低 高效率的基因扩增技术 ——应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在短短的2－3小时内体外扩增数十万至百万倍。 * * DNA测序是基因诊断中最直接、最准确的方法，通过直接分析待测基因的碱基排列顺序检测基因的突变并确定突变的部位、性质。由于自动测序技术的发展及商业化，DNA测序有望应用于临床。 Β地中海性贫血基因诊断（PCR-ASO） 已知突变Gene部位和性质，合成寡和苷酸探针，32P标记，进行Southern Blot 杂交/斑点杂交。 Normal βΑGene Probe——与正常βΑ杂交 Mutation βS Gene Probe——与异常βS杂交 βΑ/βΑ βΑ/βS βS/βS