免疫学及免疫学检验标记技术.pptVIP

标记免疫技术 医学检验系临床微生物学及免疫学教研室 二OO四年三月 标记免疫技术= 标记免疫技术 标记物: 常用的核素有两大类 γ射线： 131I、125I、57Cr和60Co β射线：14C、3H和32P。 使用最广泛的是：125I ①性质活泼、易制备标记物 ②对被标记物的免疫活性影响小 ③测量方法简便、已推广 ④半衰期较长、核素丰度高 标记方法 125I的标记 原理：取代分子中酪氨酸或酪胺残基及组胺残基上的氢原子 方法： 直接标记法 氯胺T法和乳过氧化物酶法 间接标记法 联接标记法 标记物纯化 对游离的125I等试剂与标记物进行分离 方法：分子筛凝胶过滤；离子交换层析；聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）；高效液相色谱（HPLC） 标记物鉴定 放射化学纯度 单位标记物中结合在被标记物上的放射性占总放射性的百分率。一般要求大于95％。 免疫活性 标记过程中，被标记物活性损伤程度。B/T％80％， B/T％ ↑ 抗原损伤↓。 比放射性 单位化学量标记物中所含的放射性强度. 常用Ci/g、mCi/mg、Ci/mmol等单位表示。