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人原始生殖细胞的分离和培养冷少华梁志清王凤英第三军医大学西南医院妇产科重庆摘要目的探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法方法分离培养月人胚胎的成纤维细胞经照射后作为饲养层从周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞培养在含有和的人胚胎成纤维细胞饲养层上同时采用免疫细胞化学和方法检测人原始生殖细胞阶段特异性胚胎抗原以及特异性基因的表达并进行类胚体培养结果分离的人原始生殖细胞在饲养层上可以增殖形成典型的鸟巢状集落细胞染色体均为正常的二倍体核型阶段特异性胚胎抗原表达阳性同时检测到生殖干细胞特
人原始生殖细胞的分离和培养
冷少华， 梁志清* ，王凤英*
（第三军医大学西南医院妇产科，重庆 400038）
摘要 目的 探讨体外分离培养人原始生殖细胞的条件和方法。方法 分离、培养2~3月人胚胎的成纤维细胞，经60Co照射后作为饲养层；从5-9周人胚胎的生殖嵴和肠背系膜组织中分离原始生殖细胞，培养在含有bFGF、LIF和Forskolin的人胚胎成纤维细胞饲养层上；同时采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测人原始生殖细胞阶段特异性胚胎抗原SSEA-1、SSEA-4以及特异性基因Oct-4、Ifitm-3、stella、Mvh、DAZL的表达，并进行类胚体培养。结果 分离的人原始生殖细
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