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- 2019-08-07 发布于浙江
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考点28 基因工程、蛋白质工程和细胞工程;静悟与梳理;静悟与梳理;1.基因工程常考的3种基本工具
(1)限制性核酸内切酶:识别特定核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子。
(2)DNA连接酶:①E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端;②T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。
(3)载体:①能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;②有一个至多个限制酶切割位点,便于外源DNA片段(基因)插入其中;③具有特殊的标记基因——以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。;2.基因工程的4大操作程序
(1)目的基因的获取
①从基因文库中获取。
②PCR技术扩增
a.原理:DNA双链复制。
b.条件:模板DNA、引物、游离的脱氧核苷酸、热稳定的DNA聚合酶。
;③用化学方法直接人工合成。
(2)基因表达载体的构建
①基因表达载体模式图 ;②基因表达载体的构建过程;(4)目的基因的检测与鉴定
①插入检测:DNA分子杂???。
②转录检测:DNA—RNA分子杂交。
③翻译检测:抗原—抗体杂交。
④个体水平检测:抗性接种实验。;3.图解记忆蛋白质工程;4.比较记忆植物组织培养与动物细胞培养;结果;5.植物体细胞杂交与单克隆抗体制备过程比较;(1)诱导融合的方法分别有哪些?融合的细胞类型有哪几种(仅考虑两两融合的细胞)?
提示 ①诱导植物体细胞的原生质体融合的方法主要有离心、振动、电激或用聚乙二醇作为诱导
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