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遗传学 第八章 细菌和病毒的遗传分析 本章小节 8.1 细菌的结合现象 8.2 中断杂交与染色体作图 8.3 细菌的转化与作图 8.4 F’因子与性导 8.5 噬菌体的遗传分析 8.6 细菌的转导 细菌和病毒遗传研究优势 世代周期短 便于管理和生化分析 便于研究基因突变 便于研究基因作用 便于基因重组研究 便于研究基因的结构,功能及调控机制。 便于进行遗传操作 8.1细菌的接合现象 8.1.1 细菌接合现象发现 1964年莱德伯格和塔特姆用大肠杆菌K12,证明细菌有性杂交存在。 (一)大肠杆菌杂交试验 菌株A met-(甲硫氨酸) bio-(生物素) thr+(苏) leu+(亮) thi+(VB1) 菌株B met+(甲硫氨酸) bio+(生物素) thr-(苏) leu-(亮) thi-(VB1) A、B都为营养缺陷型,在基本培养基上不能生长。 A菌株 A与B混合 B菌株 接种 ↓ ↓ ↓ ▔ ▔ ▔ 结果 无菌落 有菌落 无菌落 (二)U实验 1950年Davis(戴维斯),做了U实验,在U底部中间用滤片隔开,交替吸压。 接合:通过细胞的直接接触从供体单向转移到受体中的过程。 8.1.2F因子及其转移 1953年海斯(Hayes.w)在验证杂交时偶尔发现杂交中AB细菌作用不同,遗传物质是单向转移,A→B,不能B→A。 链霉素敏感型 strs 抗链霉素突变型strr A品系 strs strr B品系 strs strr A strs * B strr A strr * B strs 接种 ↓ ↓ 培养基 不含str 含str 不含str 含str ▔ ▔ ▔ ▔ 结果 成活 成活 成活 死亡 F因子:又称性因子或致育因子,由共价环状闭合双链DNA构成,94.5Kb约为大肠杆菌环状染色体全长的2%,以游离状态存在于细胞质中。 F因子的特点 1、原点(origin):它是转移的起点。 2、致育基因:这些基因使它具有感染性,其中一些基因编码生成F菌毛的蛋白质。 3、配对区:F因子的这一区域与细菌染色体中多处的核苷酸序列相对应,可以分别地与染色体上这些同源序列配对,通过交换整合到染色体中成为细菌染色体的一部分。 F因子存在方式 游离状态:在细胞质中 ,能自我复制独立遗传 整合状态:整合到细菌环状染色体上,与细菌染色体一起遗传。 附加体: 像F因子即可存在于染色体之外作为一个独立的复制子,也可整合到细菌染色体中,作为细菌复制子的一部分的遗传因子。 8.1.3细菌重组 Hfr: High frequency recombination带有一个整合的F因子的品系称为高频重组, F+,携带F因子的菌株称为供体菌或雄性 F-,未携带F因子的菌株为受体菌或雌性 (一)供体将F因子传递给受体的过程 1、直接将F因子通过接合管传递给受体 A品系F+ B品系F- F+细胞 * F-细胞 → F+细胞 2、F因子整合到细菌染色体上( Hfr ),通过接合管传递给受体细胞 F+细胞→Hfr细胞→ Hfr细胞 * F-细胞 → F-细胞 F因子最后进入受体细胞 接合过程示意图 Hfr菌株的形成及其基因转移 F+和Hfr的区别 F-与 F+杂交,只有F因子的传递,而细菌染色体并不转移。因此,虽F因子转移频率高,但两细菌间染色体重组频率很低,大约每百万个细胞中发生一次重组,故F+因子又称低频重组。 Hfr是F因子整合到细菌染色体上,所以供体染色体一部分传递给受体。当供体、受体染色体具有同源区,既发生重组,重组频率可达到10^-2以上,故Hfr称高频重组。 F+和Hfr的共同点 都能与F-因子进行杂
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