高效液相色谱柱的稀匀浆填充方法.pdfVIP

第 14 卷第 1 期 　　　　北 方 工 业 大 学 学 报 V o l. 14 N o. 1 2002 年 3 月 　　　　　J. NOR TH CH INA UN IV . O F T ECH. 　　　　　 M ar. 2002 高效液相色谱柱的稀匀浆填充方法 1) 2) 1, 2) 赵继红 　梁　宇 　梁泽斌 ( 1) 北方工业大学基础科学学院, 100041, 北京石景山 2) 中国科学院研究生院, 100039, 北京) 　　摘　要　介绍一种改进的高效液相色谱柱的装填方法——稀匀浆装填方法. 该方法使用无 毒、低粘度的稀匀浆溶液和较长的合适结构的匀浆罐. 在高于 70 的压力和 50 匀浆 M Pa m l m in 输送流量下, 装填 5m OD S 填料的反相色谱柱和 SiO 2 硅胶的正相色谱柱都获得良好的结果. 柱效可达到 60 000 以上; 峰对称性好, = 1～ 1. 25; 寿命长, 经过 500 次进样柱效和峰对称 m S I 性无明显变化. 关键词　稀匀浆; 液相色谱柱; 装填方法 分类号　 657. 8 O 　　液相色谱法的成功得益于高效液相色谱柱 平衡密度法类似. 从实践结果看, 用平衡粘度法 制备技术的进步. 现已经有多种H PL C 柱的填 装填色谱柱不容易得到高柱效, 而且色谱峰的 充方法: 平衡密度法、平衡粘度法、动态搅拌法 对称性也差. [ 3 ] [ 1, 2 ] 和匀浆法等 . 从溶液中悬浮颗粒的沉降理论 本文提出一种改进的高效液相色谱柱填充 知道, 为了实现固定相的均匀填充, 在填充色谱 方法—稀匀浆填充方法. 其根据是, 颗粒沉降速 柱的过程中必须防止颗粒的分级沉降. 防止颗 度与其半径的平方成正比, 被填充的固定相颗 粒分级沉降的方法有: 调整合适的溶剂密度, 增 粒度减小时, 颗粒沉降的速度明显变慢. 若固定 加溶剂的粘度, 均匀被固定相的颗粒度. 使溶液 相的颗粒度比较均匀, 采用低密度溶剂制备匀 中的颗粒密度接近于溶剂密度, 颗粒物的沉降 浆, 当匀浆中的颗粒还没有明显分级沉降之前, 速度趋向于零. 这便是平衡密度法装填法的依 用高压将固定相匀浆高速压入色谱柱中, 迅速 据, 它可以避免由于颗粒度分布较大而引起在 形成色谱柱床层. 这样可以保证固定相填料在 填充过程中的颗粒分级沉降. 因此, 用平衡密度 柱中的均匀性, 从而得到高柱效. 这样的装填方 法填充颗粒度分布较大的色谱柱也能得到较好 法要求有足够高装填压力以及装柱流量, 并且 的效果. 但是, 平衡密度法需要采用具有较大密 有严格的装柱程序. 度的卤代烃, 卤代烃的吸附将导致色谱峰的不 对称性增加. 而且卤代烃的毒性较大, 对操作者 1　实验部分 的健康极为不利. 随着工艺技术的进步, 固定相 颗粒的均匀性已经得到保证. 高密度匀浆法采 主要仪器设备: VA R IAN L C - 5000 型高 用四氯化碳、三氯甲烷或采用与一定比例的二