动物学研究毒性效应研究.pptVIP

Figure 3. Comparison of toxicities of two test materials (From Brown, 1973, with kind permission of Ann Arbor Science Publishers Inc., Ann Arbor, Mich. ? 1973) 研究亚慢性毒性剂量-反应(效应)关系，确定无毒性反应(NOAEL)和有毒性反应(LOAEL) ，提出安全限量参考值； 观察亚慢性毒性效应谱、毒作用特点和毒作用靶器官； 观察亚慢性毒性作用的可逆性； 为慢性毒理试验的剂量设计和观察指标选择提供依据； 为其他试验中发现的或未发现的毒作用提供新的信息， 比较不同动物物种毒效应的差异，为受试物毒性机制研究和将研究结果外推到人提供依据。 （二）亚慢性毒性实验的目的 实验动物对受试物的生物转化、生理生化、毒性反应与人类相当或相似。 （三）亚慢性毒性试验方法的要点 1. 实验动物的选择 (1) 物种和品系 两种实验动物，啮齿类和非啮齿类。 两种性别，每组雌雄各半； 性腺或生殖毒性，可选单性别的动物； 一般选择离乳不久的动物，大鼠6-8周龄（体重80-l00g）； 同组动物体重相差不应超过平均体重的10%，组间平均体重不超过5%。 (2) 性别、年龄和动物数 尽可能使用高等级实验动物，在符合国家实验动物标准的试验环境中进行； 国家实验动物微生物学和寄生虫学等级及监测分类，分四级：普通级、清洁级、无特定病原体级(SPF级)、无菌级。 (3) 微生物学寄生虫学等级和饲养环境 应使用清洁级及以上等级大小鼠，并饲养在屏障环境内进行试验。 (1) 经口染毒途径的方式 灌胃法； 喂饲法； 胶囊法 2．染毒方式 (2) 经呼吸道染毒的时间 每日2-6h，工业毒物可以缩短至1h，环境污染物可延长至8h。 犬静脉注射比较易行、常用 (3) 注射 长期反复腹腔注射应注意无菌操作 长期反复的直肠用药、眼睛用药等，较难进行，常不能确保给药量的准确。 (4) 特殊染毒途径的试验 为了维持实验动物体液中有一个准确的血药浓度水平，保持受试物生物学效应每日相似性，亚慢性毒性试验每日染毒的时间应保持一致。一般在每日上午进行，给药后喂食。 (5) 毒代动力学血药浓度监测 详细观察和记录动物出现的中毒体征、发生时间和体征发展的经过。 1．中毒体征及发生过程 机体对毒物作用的反应可以表现出各个系统的特征。不同系统的毒性表现可不一样；或某一中毒体征和行为的改变反映多个系统的毒性。 续表6-1 啮齿类动物急性中毒表现 实验动物的死亡数对LD50值产生明显影响。 2．死亡情况和时间分布 分析中毒死亡时间的分布规律可以提供重要信息。 实验动物体重变化可以反映动物中毒后综合性整体变化。 应定期多次称量动物的体重变化，一般为每周1次或2次。 3．体重 体重变化的原因 影响食欲或消化系统的功能； 影响食物的吸收和利用； 影响水的摄取； 肾功能急性损伤 死亡动物：大体病理变化，如脏器外观、大小、色泽的变化，有无充血、出血、水肿或其他改变； 存活动物：观察期结束时亦应进行解剖检查，必要时做组织病理学检查。 4．病理检查 染毒以后应即刻开始观察动物中毒表现和死亡情况。 （六）观察时间和周期 给药当天应连续或多次观察，以后可根据情况，每天2次或多次观察直至试验周期结束。 急性毒性试验求出LD50(LC50)值，通过LD50值进行急性毒性分级(acute toxicity classification)，评价毒物的急性毒性强弱，比较毒物的急性毒性大小。 四、急性毒性分级和评价 第二节 蓄积毒性作用 外源化学物连续地进入机体，且吸收速度或总量超过代谢转化排出的速度或总量，化学物质可能在体内逐渐增加并贮留，这种现象称为化学物质的蓄积作用(accumulation)。 一、蓄积毒性的基本概念 机体常见的储存库有血浆蛋白、脂肪组织、肝脏、肾脏、骨骼等。 储存库（depot） 化学物质易蓄积的组织部位 反复多次接触化学毒，可以用分析方法测出体内物质的原型或其代谢产物。 物质蓄积（material accumulation） 长期接触某些化学毒物后，机体内虽不能测出其原型或代谢产物，却出现了慢性毒性作用。 功能蓄积（functional accumulation） 以生物效应为指标，用经验系数（K）评价蓄积作用的方法，即将多次染毒与一次染毒所产生的毒性效应进行比较。 （一）蓄积系数法 二、蓄积作