DNA重组技术基本工具讲义人教选修III.pptVIP

选修三 现代生物科技专题 专题一 基因工程;The camelecow;为什么能把一种生物的基因“嫁接”到另一种生物上并成功表达？;基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。;基因工程培育抗虫棉的简要过程：;（一）基因工程的概念;解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？;;;（一）限制酶——“ 分子手术刀”;;;什么叫黏性末端？;;;G A A T T C;;*;;要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？;;1．下图所示限制性核酸内切酶切割某DNA的过程， 从图中可知，该限制性核酸内切酶能识别的碱基序列 及切点是(　　) ;2.下列关于限制酶的说法正确的是 A．限制酶广泛存在于各种生物中，但原???生物 中很少 B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端 D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键 ;;;;;;;4．据下图所示，有关工具酶功能的叙述错误的是(　　) ;;运载体的特点1： ;问题2 ：作为载体没有切割位点将怎样？;？;目的基因所在片段;有标记基因，以便于鉴定与选择 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 ;问题4：如果载体对受体细胞有害将怎样？ 不能分离会怎样？;细菌的质粒：自主复制的双链、闭合、环状DNA分子；;pBR322质粒结构;质粒的特点;1.以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、DNA连接酶使黏性末段的碱基之间形成氢键;2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA;3.有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传性状，培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体;1．下列关于DNA连接酶的叙述中，正确的是 A．DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢 键 B．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上 的磷酸和脱氧核糖 C．DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上 的磷酸和核糖 D．同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端;A;3.下列四条DNA分子，彼此间具有粘性末端的一组是 A．①② B．②③ C．③④ D．②④;4、关于限制酶的说法中，正确的是（ ） A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA D．限制酶只存在于原核生物中;;3、天然的DNA分子可以直接用做 基因工程载体吗？为什么？;1） 载体DNA必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。 2） 载体DNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNA上随染色体DNA的复制而同步复制。 3） 载体DNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。 4） 载体DNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。 5） 载体DNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。 实际上自然存在的质粒DNA分子并不完全具备上述条件，都要进行人工改造后才能用于基因工程操作。;4、DNA连接酶有连接单链DNA的本领吗？;再见