生物信息传递——转录.ppt

第四章 生物信息的传递 ——从DNA到RNA 在RNA聚合酶的作用下,以DNA为模板合成RNA的整个过程,包括起始,延伸,终止等步骤,叫转录。 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性： 在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 转录单元（transcription unit） 一、参与转录起始的关键酶与元件 （一） RNA聚合酶 原核生物RNA聚合酶的发现 E. coli RNA polymerase 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 （二） 启动子(promoter) 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp 不依赖 ρ因子终止子的结构 …NNAAGCGCCGNNNCCGGCGCTTTTTTNNN… …NNTTCGCGGCNNNGGCCGCGAAAAAANNN… DNA …NNAAGCGCCGNNNCCGGCGCUUUUUUNNN… RNA 抗终止的机制 依赖于噬菌体本身的依赖ρ因子的终止子 依赖ρ因子的终止子上游有抗终止信号(靠近PL 的nutL，靠近tR1的nutR nut—PN utilization) 抗终止蛋白和nut位点的结合，等待RNApol经过 时修饰RNApol的构象，拮抗寄主编码的终止蛋白ρ的活性,使之通过那些依赖ρ的终止子 真核生物三种RNA聚合酶发现过程 发现有两种RNA 聚合酶在高离子强度（如镁离子）下合成的RNA的GC含量低，在低离子强度下合成的RNA的GC含量高。 RNA的合成部位不同 三种RNA聚合酶的分离 核质和核仁的RNA聚合酶特性 核质和核仁的RNA聚合酶特性 核质和核仁的RNA聚合酶特性 三种RNA聚合酶对鹅膏覃碱的敏感性 ● 真核生物RNA聚合酶 1, RNA polⅠ启动子 Human rRNA transcription is modulated by the coordinate binding of two factors to an upstream control element R. Marc Learned, Tammy K. Learned, Michelle M. Haltiner and Robert T. Tjian Department of Biochemistry University of California, Berkeley Berkeley, California 94720, USA Cell 1986.? 1,RNA polⅠ启动子 核心启动子（core promoter）或核心元件（core element），位于-45到+20，负责转录的起始, 决定转录起始的精确位置。 上游控制元件（upstream,control element UCE），从-107延伸到-156。 启动子元件间的距离对转录效率有重要的影响。 由于rRNA在基因表达过程中的重要性(核糖体的主要成分), 因此专一性的RNA聚合酶的使用就避免了别的基因启动子的竞争,有利于对转录过程的调控控制. Cell. 1980 Jan;19(1):13-25. A control region in the center of the 5S RNA gene directs specific initiation of transcription: I. The 5 border of the region. Sakonju S, Bogenhagen DF, Brown DD. The 5S ribosomal RNA gene of Xenopus contains a region within the gene that directs the initiation of 5S RNA synthesis. This result was obtained by enzymatically deleting a fragment of X. borealis somatic 5S DNA from the 5 side of the gene and cloning the resultant mutants. These deletion mutants were tested for their ability t