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                网织红细胞(Ret)计数                   RBC生成过程:        多能干细胞         原红     早幼红       中幼红       晚幼红   成熟RBC                                                                                        Ret概念: 是介于晚幼红和成熟红细胞之间尚没有完全成熟的红细胞,因其  胞浆中尚有残存的嗜碱性物质(RNA、核糖体)经活体染色后,聚集成深染颗粒,颗粒多时形成网状,故名网织红细胞。         正常情况下,晚幼红脱核后平均需2天才能发育成完全成熟的RBC。                               RET分型   较成熟RBC稍大,直径8.0~9.5μm。         0                      Ⅰ                                 Ⅱ                             Ⅲ                                 Ⅳ                  骨髓,       外周难见    周围血少量    外周最多                               (0.08%)       (0.15%)    (60%以上)                                     花冠型    丝球型         网型、      破网型           点粒型     有核    充满,相互连接         松散,连成网   稀疏,丝点状        散在,细颗粒                                                                                   细丝状                       ICSH 及NCCLS的定义:网织红细胞是已不含有细胞核的红细胞,     故认为应分四型:  Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 。       RET 【器材和试剂】  1.?? 显微镜、Miller窥盘。  2.?? 新亚甲蓝染液(WHO推荐)                新亚甲蓝N    0.5g                草 酸 钾     1.6g                蒸 馏 水     100ml ,用前过滤。     WHO推荐,其对Ret染色力强且稳定,但该染液在室温下只稳定3周;   3.灿烂甲酚蓝染液: 灿烂甲酚蓝    1g                      柠檬酸三钠   0.4g                      氯化钠       0.85                                       双蒸水       100ml ,用前过滤。          费用低廉,国内目前使用的主要方法;但易产生沉淀。           控制Ret计数CV=10% (ICSH推荐)需镜检的RBC数 Ret(%)       窥盘小方格内镜检RBC数    相当镜检RBC总数   1~2                1000                    9000   3~5                 500                    4500   6~10                 200                    1800   11~25                 100                     900  【测定方法及评价】 1.显微镜计数法:国内的主要方法,器材价廉、作简单、费用低。    缺点:工作效率低、精密度低,操作批内重复CV在20%以上;其相对计数结果(%)显著受成熟RBC浓度的影响,使用Miller窥盘可将计数精密度控制在CV≤15%,可提高工作效率。 2.网织红细胞仪测定法:采用流氏细胞技术,将RBC经特殊荧光染料染色后,使含有RNA的RBC被计数,自动计算出RET的%及绝对数。优点:测量细胞多,避免主观因素、方法易于标准化。国外已广泛使用,国内逐步推广使用。但成本高。     近年来,新型多参数血细胞分析仪具有Ret计数功能。                                 【质量控制】 1.抗凝血最好在4h内处理,保存在4oC,可延长至8h. 2.染色温度控制在37oC为宜,无论何种染液,室温(25oC)以下染色时,RET检出率明显减低,故要求37oC恒温染色。 3. 
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