网织红细胞(Ret)计数.pptVIP

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网织红细胞(Ret)计数 RBC生成过程: 多能干细胞 原红 早幼红 中幼红 晚幼红 成熟RBC Ret概念: 是介于晚幼红和成熟红细胞之间尚没有完全成熟的红细胞,因其 胞浆中尚有残存的嗜碱性物质(RNA、核糖体)经活体染色后,聚集成深染颗粒,颗粒多时形成网状,故名网织红细胞。  正常情况下,晚幼红脱核后平均需2天才能发育成完全成熟的RBC。 RET分型   较成熟RBC稍大,直径8.0~9.5μm。 0 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ 骨髓, 外周难见 周围血少量 外周最多 (0.08%) (0.15%) (60%以上) 花冠型 丝球型 网型、 破网型 点粒型 有核 充满,相互连接 松散,连成网 稀疏,丝点状 散在,细颗粒 细丝状 ICSH 及NCCLS的定义:网织红细胞是已不含有细胞核的红细胞, 故认为应分四型: Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 。 RET 【器材和试剂】 1.?? 显微镜、Miller窥盘。 2.?? 新亚甲蓝染液(WHO推荐) 新亚甲蓝N 0.5g 草 酸 钾 1.6g 蒸 馏 水 100ml ,用前过滤。 WHO推荐,其对Ret染色力强且稳定,但该染液在室温下只稳定3周; 3.灿烂甲酚蓝染液: 灿烂甲酚蓝 1g 柠檬酸三钠 0.4g 氯化钠 0.85 双蒸水 100ml ,用前过滤。 费用低廉,国内目前使用的主要方法;但易产生沉淀。 控制Ret计数CV=10% (ICSH推荐)需镜检的RBC数 Ret(%) 窥盘小方格内镜检RBC数 相当镜检RBC总数 1~2 1000 9000 3~5 500 4500 6~10 200 1800 11~25 100 900 【测定方法及评价】 1.显微镜计数法:国内的主要方法,器材价廉、作简单、费用低。 缺点:工作效率低、精密度低,操作批内重复CV在20%以上;其相对计数结果(%)显著受成熟RBC浓度的影响,使用Miller窥盘可将计数精密度控制在CV≤15%,可提高工作效率。 2.网织红细胞仪测定法:采用流氏细胞技术,将RBC经特殊荧光染料染色后,使含有RNA的RBC被计数,自动计算出RET的%及绝对数。优点:测量细胞多,避免主观因素、方法易于标准化。国外已广泛使用,国内逐步推广使用。但成本高。 近年来,新型多参数血细胞分析仪具有Ret计数功能。 【质量控制】 1.抗凝血最好在4h内处理,保存在4oC,可延长至8h. 2.染色温度控制在37oC为宜,无论何种染液,室温(25oC)以下染色时,RET检出率明显减低,故要求37oC恒温染色。 3.

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